检测胞内分子，固定破膜后细胞表面抗原的阳性率增加

天天向上 · 发表于 2022-4-22 10:03:09

大家好，我在检测胞内的Ki67时，对比了一下未固定破膜和固定破膜（BD Fixation/Permeablization Kit）前后，细胞表面的抗原（TCR和自己表达的一个蛋白），发现固定破膜后细胞表面的抗原阳性率比没有固定破膜的高2~5%。想问一下各位知道其中的原因吗？谢谢！

niwanmao · 发表于 2022-4-22 16:20:05

分群清楚吗？如果分群不清，是否有设置对照？

天天向上 · 发表于 2022-4-22 17:36:40

niwanmao 发表于 2022-4-22 16:20
分群清楚吗？如果分群不清，是否有设置对照？

所有组的分群都很清楚

niwanmao · 发表于 2022-4-22 19:20:47

天天向上发表于 2022-4-22 17:36
所有组的分群都很清楚

那么CV是多少？

Climber · 发表于 2022-4-23 11:26:22

其实感觉这种情况没法解释
固定破膜比未固定破膜 FSC/SSC会受到一些影响，简单来说就是细胞会变小，圈门的位置可能需要改变

半年y · 发表于 2022-5-13 18:17:41

会的，实际中我也经常遇到，比如我固定破膜样品的CD45阳性率相对仅表染的细胞会有较大差异，原因我至今没想清楚

范晋波 · 发表于 4 天前

考虑因素：1.圈门问题；2.固定破膜肯定会丢失破裂一部分细胞，可能会造成基数变小，比例升高；

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[结构和原理] 检测胞内分子，固定破膜后细胞表面抗原的阳性率增加