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[结构和原理] 检测胞内分子,固定破膜后细胞表面抗原的阳性率增加

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 楼主| 发表于 2022-4-22 10:03:09 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
大家好,我在检测胞内的Ki67时,对比了一下未固定破膜和固定破膜(BD Fixation/Permeablization Kit)前后,细胞表面的抗原(TCR和自己表达的一个蛋白),发现固定破膜后细胞表面的抗原阳性率比没有固定破膜的高2~5%。想问一下各位知道其中的原因吗?谢谢!

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发表于 2022-4-22 16:20:05 | 显示全部楼层
分群清楚吗?如果分群不清,是否有设置对照?
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 楼主| 发表于 2022-4-22 17:36:40 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2022-4-22 16:20
分群清楚吗?如果分群不清,是否有设置对照?

所有组的分群都很清楚
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发表于 2022-4-22 19:20:47 | 显示全部楼层
天天向上 发表于 2022-4-22 17:36
所有组的分群都很清楚

那么CV是多少?
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发表于 2022-4-23 11:26:22 | 显示全部楼层
其实感觉这种情况没法解释
固定破膜比未固定破膜 FSC/SSC会受到一些影响,简单来说就是细胞会变小,圈门的位置可能需要改变
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发表于 2022-5-13 18:17:41 | 显示全部楼层
会的,实际中我也经常遇到,比如我固定破膜样品的CD45阳性率相对仅表染的细胞会有较大差异,原因我至今没想清楚
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发表于 4 天前 | 显示全部楼层
考虑因素:1.圈门问题;2.固定破膜肯定会丢失破裂一部分细胞,可能会造成基数变小,比例升高;
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