流式死活分群问题

shiyisyl

各位老师，想请教个问题。
第三张图的live细胞圈门是否正确？
有技术说，我图1里圈的两群都是活细胞，只是大小不同，有的细胞活化了，有的没有活化，所以会分两群，所以live那里，分的两群也都是活细胞。
这样理解对吗？
还是说图3两群分别是死、活。
死活染料：1/1000倍稀释用的，浓度不算高了。

范晋波

看前侧向，图3应该都是活细胞，只不过染色效率不一样，阳性的荧光强度有差异，判断方法很简单，做一个blank，确认下阴性区位置即可~

shiyisyl

范晋波 发表于 2022-5-18 10:38
看前侧向，图3应该都是活细胞，只不过染色效率不一样，阳性的荧光强度有差异，判断方法很简单，做一个blank ...

刚看了，blank样本确实是10^3左侧，所以右边的是dead。

范晋波

shiyisyl 发表于 2022-5-18 13:19
刚看了，blank样本确实是10^3左侧，所以右边的是dead。

祝顺利，另外你用DX的话，可以使用放大镜或者调整坐标轴范围的方式让分群明显一点，图会很好看

shiyisyl

范晋波 发表于 2022-5-18 14:11
祝顺利，另外你用DX的话，可以使用放大镜或者调整坐标轴范围的方式让分群明显一点，图会很好看 ...

好的，感谢指点

2315471758

shiyisyl 发表于 2022-5-18 17:15
好的，感谢指点

这是染料的问题还是细胞问题呀，正常来说死活分群应该挺明显的吧，还是坐标轴可能在拉开一点比较好

范晋波

2315471758 发表于 2022-10-10 16:31
这是染料的问题还是细胞问题呀，正常来说死活分群应该挺明显的吧，还是坐标轴可能在拉开一点比较好 ...

他用的应该是僵尸染料

wmj123456

范晋波 发表于 2022-10-13 09:55
他用的应该是僵尸染料

有见过僵尸染料分3群的吗？这张图是肿瘤组织样本的混染，死活单染中很明显分了2群，活性百分比大于95%。所以觉得这个样本的活性应该不错，但是不理解为什么混染中死活分了3群？

niwanmao

wmj123456 发表于 2024-1-9 22:22
有见过僵尸染料分3群的吗？这张图是肿瘤组织样本的混染，死活单染中很明显分了2群，活性百分比大于95%。 ...

一般来说，在多色方案中应用死活染料，还是建议将死活染料和其它荧光素分别组合看一下散点图，一般会呈现为一种补偿无法调到位的斜向分布，在那里可以找到线索。

Yuck

胺基染料是会连续。我跟技术观点一致，左边那一群的确属于活细胞，不过分析的话跟倾向于应该是属于快凋亡类的活细胞，可以做个凋亡试试，活化分群应该不至于差别这么大。一般淋巴实验都是用那边那群。