找回密码
 加入流式中文网

QQ登录

只需一步,快速开始

查看: 435|回复: 5

[细胞因子检测] Th1/17检测中PMA刺激,IL-17A检测不到

[复制链接]
发表于 2022-6-25 15:26:09 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏5流星未解决
在检测Th1/17中,使用PIB对PBMC细胞(单采血采集后分离的PBMC)进行刺激。
已经对PIB中的浓度以及PIB刺激时间进行过测试。
各种方法尝试后,IL-17A均无表达。
请问有没有老师遇到过这样的情况,是由于什么问题导致的呢?对于PBMC刺激,检测Th17有什么好的解决方式么?

流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2022-6-25 19:55:22 | 显示全部楼层
如果确定刺激条件没有问题,那么可能性最大的就在于染色上面,可能是抗体,也可能是破膜剂。
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2022-6-26 09:34:03 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2022-6-25 19:55
如果确定刺激条件没有问题,那么可能性最大的就在于染色上面,可能是抗体,也可能是破膜剂。 ...

倪老师,实验中Th1和Th17是在一个panel中一起规定破膜的,Th1是检测到的,那说明破膜条件应该是ok的。抗体的话,是抗体量的问题么?但是抗体我已经是厂家推荐的最高量了。
想问一下 样本本身PBMC经过冻存后会不会对Th17的表达有很大的影响
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2022-6-26 17:04:03 | 显示全部楼层
无知的牧羊人 发表于 2022-6-26 09:34
倪老师,实验中Th1和Th17是在一个panel中一起规定破膜的,Th1是检测到的,那说明破膜条件应该是ok的。抗 ...

抗体量并非越多越好,而是有一个范围。
Th1你所能测的到,不知道表达率、分群是否正常?尽量能放图上来讨论吧。
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2022-6-28 16:46:03 | 显示全部楼层
请见附图
1656405790.png
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2022-6-28 20:38:05 | 显示全部楼层

VioGreen和VioBlue补偿如何?是否在排除VioGreen的时候,把VioBlue阳性的信号排除掉了?
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则 需要先绑定手机号

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2|浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2024-3-29 04:38

Powered by Discuz! X3.5

© 2001-2024 Discuz! Team.

快速回复 返回顶部 返回列表