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[凋亡检测] 请问有人做过全血的流式吗,不裂红的那种

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发表于 2023-4-8 10:56:52 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
我们做了一个荧光的纳米颗粒,理论上是结合凋亡细胞的,所以我取1ul全血加100ulPBS重悬,然后加CD45来区分红白细胞,然后用凋亡试剂盒检测凋亡细胞,这样的话看看纳米颗粒是结合凋亡的白细胞还是红细胞,但是昨天做实验什么荧光都没有,不知道什么原因,因为是全血所以没有离心洗涤,只重悬了,加了荧光抗体没有洗也直接测了,然后分群也感觉不对

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组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2023-4-8 15:23:38 | 显示全部楼层
横坐标和纵坐标分别是什么标记?
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发表于 2023-4-8 20:22:10 | 显示全部楼层
你先调大稀释倍数,大于1:500 。然后CD45占比太少了  CD45换CD235α(红细胞标记)试试。
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 楼主| 发表于 2023-4-9 22:59:32 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2023-4-8 15:23
横坐标和纵坐标分别是什么标记?

用的FSC和SSC
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发表于 2023-4-10 08:22:04 | 显示全部楼层
建议:
1、先上一管只有全血细胞的管子(不知道你们的纳米颗粒是结合红细胞还是白细胞,如果白细胞的话,则需要取100ul全血+3ml裂解液 裂解红细胞再上),确认靶细胞(红细胞?还是白细胞)位置。如果是红细胞,则FSC和SSC均设为LOG坐标,将红细胞群位置放在中间区域,如果是白细胞,则FSC和SSC在LOG坐标时,放在右上。
2、再上一管只有纳米颗粒的管子,看一下纳米微球所处的位置,FSC和SSC均用LOG。
3、如此,便清楚了两者之间的差异,此时,再做实验管。
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