求教

xiaodouhn · 发表于 2023-9-5 22:50:21

各位大佬：

作为一个流式小白想请教一个问题，最近在做一个实验，前期需要将DC和酵母共培养，后面需要对DC细胞是否激活进行流式鉴定，这时遇到了一个问题，共培养后酵母和DC细胞无法分离，上流式上也没法分辨是酵母还是细胞，做得一脸懵逼啊，请问有人做过类似的实验吗，是如何操作的

niwanmao · 发表于 2023-9-6 08:19:14

可以用CD14、CD11c、HLA-DR、CD123，很容易分析DC细胞。

只用FSC和SSC物理学参数肯定不行的。

wxd · 发表于 2023-9-6 10:19:21

有钱的话，用倪老师的方法买流式抗体来标记树突状细胞，结果比较可靠。没钱的话，用CFSE标记酵母或者树突状细胞，毕竟CFSE比流式抗体便宜很多。担心CFSE标记会对DC成熟产生影响的话，就标记酵母细胞。想要结果更准确，就标记DC。

xiaodouhn · 发表于 2023-9-6 20:59:10

niwanmao 发表于 2023-9-6 08:19
可以用CD14、CD11c、HLA-DR、CD123，很容易分析DC细胞。

只用FSC和SSC物理学参数肯定不行的。 ...

感谢倪老师指导！CD11c的抗体我买了，但只是鉴定了一下诱导分化的DC，后面共孵育的时候没有用这个，我天真的以为只要我用空的DC细胞来调电压，就可以排除酵母

xiaodouhn · 发表于 2023-9-6 21:00:18

wxd 发表于 2023-9-6 10:19
有钱的话，用倪老师的方法买流式抗体来标记树突状细胞，结果比较可靠。没钱的话，用CFSE标记酵母或者树突状 ...

感谢老师的指点！我都去试一下

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