鉴定人的PBMC各类细胞有哪些Marker？

hbezyr

论坛里面的老师同学们好！
如果，我对人的PBMC进行某种刺激，会有IFN-gamma的释放。现在想说明下，在这种刺激下释放的IFN-gamma主要是由哪类细胞释放的。

因为在Mice中的研究结果表明，IFN-gamma可以由T细胞，Nk 细胞，以及APC（Macrophage和DC）在一定刺激下产生。那么我想在我所加的刺激下，检查上述各类细胞产生IFN-gamma的情况。

问题：
1、其中的人Nk细胞可以用哪个marker（最好一个就行了的那种）来作特异性说明？CD56可以吗？
2、人PBMC中的Macrophage和DC都可以用CD14这个Marker来代替吗？
3、因为在PBMC中有粒细胞，而没于粒细胞是否可以产生IFN-gamma的报道，那么粒细胞有什么特异性的Marker吗？
4、作IFN-gamma胞内染色，所用的抗体有推荐吗？
麻烦了！

niwanmao

1、NK细胞可以用CD56作为特异性标记，亦可以再加上其它系列特异性标记作为排除抗体，详见：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2118-1-1.html

2、一般正常人PBMC中不太可能会出现巨噬细胞，所以我觉得你用人的PBMC做巨噬细胞不靠谱。至于DC，也是极其极其少的，关于DC的标记，可参考：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-545-1-1.html，
CD80、CD83、CD86比较常用。

3、粒细胞最常用的标记是CD15高表达。

4、IFNγ胞内染色，其抗体不一定要局限于哪个品牌，关键看克隆号，目前protocol中用的比较好的是克隆号是B27，标记最好选择亮一些的，如PE或APC：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2123-1-1.html。克隆号可以在抗体说明书中查到。