一个直标一个间标都是鼠源性是否可以

fdgg012345

准备做流式双染测细胞比例。
有一个直标，一个间标（小鼠抗人一抗A，FITC-大鼠抗小鼠二抗B，PE-小鼠抗人一抗C）
步骤：先A孵育，洗涤后B孵育，再洗涤后C孵育
不知道这样做双染是否可行？望老师指点，谢谢。

niwanmao

理论可以，但实际上说不好，担心二抗会对C的结合有空间位阻或其他影响。如果B有一抗尽量用一抗。

fdgg012345

niwanmao 发表于 2014-5-21 06:35
理论可以，但实际上说不好，担心二抗会对C的结合有空间位阻或其他影响。如果B有一抗尽量用一抗。 ...

嗯，谢谢老师，那个指标的直标暂时没找到，只能先这样试试看了。

fdgg012345

niwanmao 发表于 2014-5-21 06:35
理论可以，但实际上说不好，担心二抗会对C的结合有空间位阻或其他影响。如果B有一抗尽量用一抗。 ...

倪老师，我还有一个问题，我的C抗原，从免疫组化看是表达在胞膜和（或）胞浆的，那么我做流式染色要怎么染呢，要染2次吗（先染胞膜--固定--破膜--再染胞浆），还是直接取后3步？

niwanmao

fdgg012345 发表于 2014-05-21 11:31:07

                               
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倪老师，我还有一个问题，我的C抗原，从免疫组化看是表达在胞膜和（或）胞浆的，那么我做流式染色要怎么

我觉得后三步即可

fdgg012345

niwanmao 发表于 2014-5-21 12:09
我觉得后三步即可

谢谢老师指导。