进样速度是越慢越准吗

wsnxbdr

进样速度，即样品进入流动室的流量，越低的话，形成的液流越细，细胞分的就越开，不容易出现二联体。所以不考虑时间，成本等因素，进样速度越低，越准确。这样说对不对？

另外，进样速度低，有可能相邻的细胞离的太远，是不是有可能会导致CV变高？如果是的话，提高样品中细胞的浓度，是不是可以在一定范围内改善这一情况。

chymanhz

速度低不容易出现二联体这个说法不妥当，只是说越慢样本流直径越小，激光光斑中心和样本流中心对准，样本是包裹在样本流里的，所以，慢的情况下，样本被束缚在正中心，和激光激发的时候处于激光光斑中心，出来的信号越大，（PS，激光光斑能量是高斯分布的，中心高，2侧低），细胞中心通过概率大，每个相似的细胞信号大小差异不大。如果速度快，样本流直径变大，细胞在样本流内分布概率随机，那么通过激光光斑中心的概率就会变小，整体跑下来，通过中心和边缘的细胞信号大小有差异，CV会变大。这就是周期的话建议用低速。

chymanhz

另外，浓度适宜CV会小，太高或者太低都会有影响，一般就10^5~10^8之间，我尽量用10^7

wsnxbdr

chymanhz 发表于 2014-6-26 09:30
另外，浓度适宜CV会小，太高或者太低都会有影响，一般就10^5~10^8之间，我尽量用10^7 ...

为什么浓度太低也会影响CV，这一点我觉得也正常，但我给不出合理的解释。
您说的10^7单位是个/ml吗

chymanhz

旧的一些仪器，激光器的稳定性没有那么好，稀的样本会需要更多的时间，激光功率，流路稳定性，样本温度等等拖的时间长，荧光淬灭等等，有一些影响。

huikaimin

谢谢解答，确实我有次无意用中速跑的细胞周期，CV确实很高。