Treg流式数据分析

王娟

niwanmao 发表于 2015-4-30 22:13
还不知道你的仪器激光器配置，没法推荐。能否先告知激光器和滤光片的配置？ ...

我们这台仪器是贝克曼mflo，有488和紫外两个激光器，滤光片有529/28, 575/25, 620/29, 670/30, 785/62, 457/60, 620/29共7个滤光片。先在这里谢过倪老师了。

niwanmao

王娟 发表于 2015-5-3 20:52
我们这台仪器是贝克曼mflo，有488和紫外两个激光器，滤光片有529/28, 575/25, 620/29, 670/30, 785/62, 4 ...

CD4-PE  488激发，575/25检测
CD25可以用现成的PerCP-cy5.5，670/30检测，也可以考虑改成紫外激发的染料，但可能比较难找。
foxP3 PE-cy7    488激发， 785/62检测

王娟

niwanmao 发表于 2015-5-3 21:41
CD4-PE  488激发，575/25检测
CD25可以用现成的PerCP-cy5.5，670/30检测，也可以考虑改成紫外激发的染料， ...

倪老师，我现在的问题是这样的，我用CD4-PE，CD25-PerCP-cy5.5双染检测到双阳性的细胞特别少，几乎都没有。我测得是小鼠的脾淋巴细胞，抗体也是鼠源的，所以才会觉得是不是抗体搭配错了呢？

王娟

王娟 发表于 2015-5-4 08:18
倪老师，我现在的问题是这样的，我用CD4-PE，CD25-PerCP-cy5.5双染检测到双阳性的细胞特别少，几乎都没有 ...

如果抗体搭配没有问题的话，那您能不能指点下，到底哪里出现了问题呢？也染了很多次，每次都是这样。

niwanmao

王娟 发表于 2015-5-4 08:18
倪老师，我现在的问题是这样的，我用CD4-PE，CD25-PerCP-cy5.5双染检测到双阳性的细胞特别少，几乎都没有 ...

鼠源性抗体检测小鼠？这个不对吧。

王娟

niwanmao 发表于 2015-5-4 08:34
鼠源性抗体检测小鼠？这个不对吧。

我说错了，不好意思，倪老师，都是抗鼠的抗体。

niwanmao

王娟 发表于 2015-5-4 08:36
我说错了，不好意思，倪老师，都是抗鼠的抗体。

能够抗小鼠就可以啊。此外，CD25分群是不太好的，主要还是看CD4和foxP3的分群的。