〖你问我答〗滴定的目标是什么？

niwanmao

滴定的目标是什么
流式结果要做的好，抗体首先需要滴定，使得我们了解抗体在什么浓度下效果最好。
那么滴定的目标究竟是什么？简而言之，两个：

1、阳性峰尽量强。
2、阴性峰尽量和未染色的位置差不多，不能偏移太多。

更定量些的指标就是染色指数或分离指数，但阴性峰的标准不能变。

如下图，从上到下依次是未染色、1:40稀释、1:20稀释、1:10稀释、1:5稀释，根据上面这个原则，你是不是就可以判断出哪个浓度最好？

当然是1：10了。

站内很多站友也经常会问到，我要做的抗体在细胞上表达很弱，无法出现一个明显的阳性峰，怎么滴定？
这种情况确实不太适合滴定，我的建议是目标抗原肯定可以找到一种阳性表达的细胞或细胞株，用那种细胞来滴定抗体，如果找遍天下都没有，那我也无能为力了，只能使用厂家推荐的量了。

关于吐槽
最后说一下上个周末调查结果中的吐槽部分，昨天觉得吐槽太犀利，因此不准备公开，但留言中似乎感兴趣的FLOWER挺多，还被一位站友批评了一番^_^。那么我就公开一些不涉及品牌的吧，并非我不够勇敢，而是那些涉及到品牌的还是需要证实才行您说是吧？

软件不够智能，大批量样本分析比较繁琐
抗体无证
故障偏高，速度慢
缺点是不能分选
挺好的，熟悉磨合中
很好，很顺利，没有什么可以吐槽的。
希望厂家提供除机器配套电脑以外的分析软件
大，运行不方便，需要小巧
1、自动补偿是个噱头，名不副实；  2、细胞周期拟合同样是噱头。  3、UI还比较合适，方便操作，简单。
软件好用，各方面比较优秀，售后也不错！缺点就是我们激光有点少！
不好分析结果
内存不足，经常需要清理以前的数据  有的电压不稳定，每次测流式图不太一样
挺好用很方便，上手快，
无标准化操作，多色组合试剂少
每次做流式，准备细胞，胞外标记，固定破膜，胞内标记，上机，反正都要加班，可怜啊。。。优点的话，就是想获得某些数据，首先想的是流式数据，因为挺方便的，快速，直观，数据可靠。
准确度，维护麻烦
每次启动液流时间好长，机器容易堵。
进样盘经常发生故障
调试有些麻烦
10色仪器工作时不可以改标签
荧光色太少
用过很多，其实流式最关键的部分在制样，制样差距太大了。
导出图像像素太低。。。
监测速度快
操作里面汉化
软件还有改进的空间，上样方式多样化
连续表达的样品分选效率低
开机越来越慢了
缺点软件没有等高线图和不规则门的设定
开机吐水
补偿调节困难
型号太老
优：快速，缺：存在一部分假阴假阳，需结合其他检测结果。
需要一台能安装在安全柜内的分选仪
处理样品麻烦
还行
目前我们这台仪器虽然好用，到说明书不是很强，相对于新手来说有点难，才买一年已经修了不下五次了不知是否是个人原因还是仪器的问题！
优点:系统稳定，操作方便！缺点:不能把软件拷贝出来在其他电脑终端分析数据
鞘液桶和废液桶盖子太差了。
单激光配置太低
检测速度快，灵敏度高，容易堵针
相当慢啊，四色也很浪费抗体，遇到复杂的要处理很多管标本
上样麻烦，保养麻烦
调电压不太熟练
软件有时不够智能，手动操作比较多。
缺点就是太傻了，没有鞘液了，也不提醒。必须时刻注意以免吸空。
还可以，基本满意
电压有些时候不稳，还不够很自动，电压，补偿方面，经常出现连不上机。优点，出现问题很容易解决，不会经常堵，TBNK自动软件很好用
清洗管路太繁琐，没有自动化程序。
分辨率太低
目前的流式细胞仪较陈旧，即使过滤后仍经常堵管，配置的电脑分析系统也较陈旧
激光颜色太少了，分析软件不够傻瓜
软件不好用有待改进

通过留言，再结合我自己平时的感受，于是做了一个长期开放的“流式吐槽”页面，长期接受各种不爽的发泄（进入方式：点击顶部“关注微信”按钮，扫二维码关注“流式中文网”公众号，通过公众号菜单〖我〗—>〖我要吐槽〗）：
当您在做流式检测或分选时，如果遇到仪器Bug或试剂质量问题的时候，可随时随地在此进行匿名吐槽，但需附上图片和相关说明，禁止恶意攻击。
我会定期整理一些靠谱的、证据客观真实的吐槽进行公开。
吐槽是一种发泄，但同时也是科技发展的动力！

圣诞、元旦双节礼品大赠送
即将到来的圣诞节和元旦（简称双蛋节），十分热闹，众多商家大酬宾，大家胡吃海喝。流式中文网也不免俗，来凑个热闹，给热爱流式的各位FLOWER送上一些好礼，礼品我就不介绍了，看图，届时会从12月24日～1月2日采取分享抽奖的形式送出，希望流式中文网在未来的日子中继续陪伴大家一起成长。

还有若干鼓励奖，可选择50颗流星、魔滤试用装、MemMagician新型破膜剂试用装等等。

clz281

印有“流式中文网”潘多拉魔音盒台灯，可以去“新奇制造”里买或者兑换吗？

niwanmao

clz281 发表于 2016-12-22 10:05
印有“流式中文网”潘多拉魔音盒台灯，可以去“新奇制造”里买或者兑换吗？ ...

暂时没有兑换，这次作为奖品抽奖用。