如果一抗的来源相同，可不可以做多色染色

steven

大家也许都会遇到这样的问题，有的时候需要用的抗体可能只有一种来源，那么这时候如果需要做多重染色该怎么办呢？
今天脑洞大开，想了一种方法不知道可行不可行，希望和大家探讨一下。
比如说有两个膜表面抗体anti-A和anti-B，都是兔子来源，然后二抗是488和647，都是山羊来源，那么可不可以这样做来达到多重染色的目的。
1.固定
2.封闭
3.孵育Rabbit-anti-A和Goat-anti-rabbit-488
4.充分的洗涤
5.孵育Rabbit-anti-B和Goat-anti-rabbit-647
6.再次洗涤
虽然一抗的来源相同，但是第一次加二抗的时候，488二抗充分的结合了所有一抗A的位点，再第二次加二抗，647的二抗只结合在后来加入的一抗B上面。A和B这样就可以区分开了。
纯属自己瞎想，不知道大家有什么看法。

niwanmao

理论上是可以，但是还是建议验证后使用。
首先这种极端情况还是很少的，其次，如果真碰到，可以考虑用阳性样本，单标与双标对比，验证没问题之后，再继续。

steven

niwanmao 发表于 2020-4-22 21:33
理论上是可以，但是还是建议验证后使用。
首先这种极端情况还是很少的，其次，如果真碰到，可以考虑用阳性 ...

好的，谢谢倪老师。如果真需要这么做的话，我先验证一下再做。