线粒体电位JC-10，加药组有明显分群，但是空白组偏4象限

cylucy1602

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2021-6-14 17:46 上传

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上机没有调补偿，可以用flowjo软件调补偿吗？未调补偿的情况下，发现加药组有明显分群，但是空白组没有分群，且偏向第四象限，求助这是怎么回事啊？左边为空白，右边为加药组。上传了原始FCS文件，麻烦大佬帮忙看看，感谢~

niwanmao

cylucy1602 发表于 2021-6-14 16:16
倪老师，已经上传，麻烦您看看，谢谢~

看了下原始数据，发现你所说的PE高表达的信号，其实是那些已发生死亡的细胞。所以我觉得需要排除，仅圈上面的A门信号。
只圈A门，发现没有出现明显的PE降低而FITC增高的信号。所以我在想：
1、是否药物无诱导凋亡作用？或者能诱导，但不是通过线粒体途径？

2、染色出了问题？
3、染色和药物均无问题，那么PE通道电压需继续调高，并加做CCCP诱导的阳性对照。

niwanmao

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cylucy1602

niwanmao 发表于 2021-6-14 15:48
没看到图片，请点击你这个帖子的底部“编辑”，通过工具栏上的“图片”按钮，上传图片。 ...

倪老师，已经上传，麻烦您看看，谢谢~

cylucy1602

niwanmao 发表于 2021-6-14 21:01
看了下原始数据，发现你所说的PE高表达的信号，其实是那些已发生死亡的细胞。所以我觉得需要排除，仅圈 ...

明白了，感谢倪老师，我再加上CCCP对照再看看，非常感谢~

cylucy1602

niwanmao 发表于 2021-6-14 14:23
看了下原始数据，发现你所说的PE高表达的信号，其实是那些已发生死亡的细胞。所以我觉得需要排除，仅圈 ...

倪老师，还有几个问题，机器上不太会调补偿，可以收集后在flowjo上调吗？我用的通道是FITC和PE的，这两个是否可以用作JC-10的两个通道？还是都需要用488的激发？

niwanmao

cylucy1602 发表于 2021-6-15 10:04
倪老师，还有几个问题，机器上不太会调补偿，可以收集后在flowjo上调吗？我用的通道是FITC和PE的，这两个 ...

都是可以的。