BD红裂液和PMA刺激匹配吗？

sugarswallow · 发表于 2011-3-23 19:54:14

尝试直接用全血（不用分离PBMC）检测IL-17的频率。用PMA+离子霉素和gorg-stop阻断剂，培养5h，当加完表面标志后，用BD红裂液裂解红细胞，裂解后离心，发现细胞已经凝集成片状了，类似于像一个“皮屑”，加入PBS后重选，沉淀怎么也不能吹散？不知道坛子里的朋友们碰到这码子事没有，BD红裂液是work的，上午才用它裂解了未经刺激的全血，效果很好！是不是就不能用全血法检测IL-17或者其他胞内因子？请帮我出出招？

sugarswallow · 发表于 2011-3-24 18:16:55

我倒觉得估计跟PMA活化后对红细胞膜的影响有关。有说法是PMA使红细胞的膜更有韧性，使用方法的话，觉得应该没有多大差别，跟没有活化的全血是一样的做法？没有活化的全血都没有问题。裂解得很好！确实比国产的红裂液好？但是PMA活化或者离子霉素或者阻断剂得有影响？

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[细胞因子检测] BD红裂液和PMA刺激匹配吗？