小鼠骨髓中浆细胞不分群的问题

xiaoxicindy

各位老师，第一次提问，不好意思哈，问的可能比较基础，不好意思哈~
我做的是小鼠（dba1）骨髓流式，主要观察目前出现的问题：
1.t细胞、单核细胞、浆细胞均不分群，我想问别的流式会不会有这种问题出现？不分群的原因有哪些？
2.有的人说浆细胞不分群是我选的marker不对，细胞圈群不对，我选的是CD138作为浆细胞标记，细胞圈的是粒细胞群，对不对？
3.cd138明显飘到右侧了，我想问出现这种细胞群整体漂移的原因有哪些呢？

xiaoxicindy

niwanmao 发表于 2015-1-6 19:22
1、你指的是FSC/SSC散点图不分群吗？一般T细胞和单核细胞会分开的，但浆细胞在fsc/ssc上可能混在其中难以分 ...

谢谢老师的解答
我是想问那张fsc-ssc图，浆细胞圈的群是粒系，这样对吗？还是应该圈其他群？因为我看学校老师是这样圈的，我问了一次，他说主要表达在粒系群里，但是这样做出来的图（分析数据时画门的图）并未分群，只是一坨细胞被十字门切开，我想问这样的图正常吗？
我查了资料，小鼠的浆细胞marker也是CD138，但是有的人说只用cd138一个marker不行？但是我不知道还要再添什么marker才能标记浆细胞？科里一个博士曾经用CD19-CD138+标记的小鼠脾脏当中的浆细胞，是分群的，为什么骨髓当中不分群呢？
谢谢老师~~

xiaoxicindy

niwanmao 发表于 2015-1-7 08:34
至少在人类标本中，正常浆细胞的SSC不会这么大，大概与单核细胞类似，圈粒系区域肯定不够，而应该根据CD13 ...

我试着操作了一下，自己觉得调出来的结果怪怪的，感觉不对，还是不分群呀~
我把原始数据上传了一下，老师能否师范一下到底怎么通过CD138圈细胞设门？
荧光标记是：cd4 B220 CD14都是fitc，RANKL是pe，cd138是percp-cy5.5,谢谢老师啦