药物处理过的细胞，如何在FSC/SSC界面选取目标细胞群？

yzm

肿瘤细胞在经过药物处理三天后，在与对照组（未处理组细胞）相同电压下，其在FSC/SSC界面就看不到像对照组一样明显的目的细胞群了。想问问各位老师这种情况要如何处理？我后续也调低了FSC和SSC的电压，但几乎没什么区别，还是无法看到明显的目的细胞群。是否要缩短药物处理的时间？

yzm

niwanmao 发表于 2024-3-27 07:49
Annexin/PI染色结果如何？如果死亡细胞过多，需要减少剂量或时间

感谢倪老师回复，早凋加晚凋加一起百分之三十左右。我现在打算把加药时间缩到两天再试试看。

yzm

范晋波 发表于 2024-3-27 10:19
最好的办法就是和对照组圈同一位置，门保持一致进行分析

用同样的门会导致加药物所圈的细胞太少了，就很尴尬

yzm

niwanmao 发表于 2024-3-27 07:49
Annexin/PI染色结果如何？如果死亡细胞过多，需要减少剂量或时间

想再咨询一下老师，当细胞被药物处理之后会导致细胞的FSC和SSC发生变化么？根据我自己所查的结果来看，凋亡细胞的FSC会减少SSC会增加，但是我的加药物细胞似乎也没有向左上方移动。

yzm

wxd 发表于 2024-3-27 09:34
从Specimen这个单词看，你用的大概率是BD公司的流式细胞仪，这个情况应该是有人把消光片从大换小了。依据就 ...

果然是行家，确实是BD的。但是上述两张图是在同一时间测出的，应该不存在消光片发生变化的情况。碎片区域变大会不会是细胞被杀伤导致的？

yzm

niwanmao 发表于 2024-3-28 09:27
凋亡，是往左上去的

但是从图上看，可能更多的细胞是碎掉了，相当于已经是坏死阶段了，因此建议的是减少 ...

好的，谢谢老师！

yzm

wxd 发表于 2024-3-28 09:39
这样的话，就需要考虑药物、药物溶剂在培养基中所占比例、药物对贴壁细胞耐受消化等方面的影响了。药物对细 ...

谢谢老师，我再试试看