人人为我，我为人人－－荧光扣除对照（FMO）

niwanmao

小憨 发表于 2015-5-11 23:48
倪老师我有个问题：FMO对照可以用beads做吗？

你是指抗体用beads代替吗？可以的。基本上能够反映大概的情况。

小憨

niwanmao 发表于 2015-5-12 15:40
你是指抗体用beads代替吗？可以的。基本上能够反映大概的情况。

嗯，我是指用beads代替细胞，就是补偿微球，同时加入多种抗体标记，能一起标记上吗？

niwanmao

小憨 发表于 2015-5-12 15:54
嗯，我是指用beads代替细胞，就是补偿微球，同时加入多种抗体标记，能一起标记上吗？ ...

前面口误，是你说的这个意思，补偿微球可以。

小憨

niwanmao 发表于 2015-5-12 16:24
前面口误，是你说的这个意思，补偿微球可以。

又涨姿势了，谢谢倪老师~

shankelj1991

老师，刚学流式，想问下，Fc受体抗体针对抗原的非特异性位点而设，同型对照是针对抗体的非特异性位点而设，FMO对照针对荧光渗漏而设，这样理解对吗？要是连续表达的话是必须设同型对照还是必须设FMO，我有点晕了。还有空白对照，也是必须的吗？FcR抗体既然已经用了，那同型对照为什么还要用呀。。同型对照和FMO都与设门有关吗？

niwanmao

shankelj1991 发表于 2015-6-14 17:30
老师，刚学流式，想问下，Fc受体抗体针对抗原的非特异性位点而设，同型对照是针对抗体的非特异性位点而设， ...

关于各种对照，此处有解答：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-3888-1-1.html

Fc阻断只是阻断那些细胞表面Fc受体，减少背景水平，你不能用它来设门的啊，所以它与对照无关

luoying1983121

老师，你好，我最近在做胞内因子IL10的染色，的确觉得设门有些困难。我开始用的是同型对照，按照我们实验室的常规，将同型对照控制在0.9-1.1，但是实验组的值就很高，而且感觉实验组的细胞群有上移的趋势，我觉得可能就是设门不对的问题。如果我每次都要做FOM，是否只做胞内因子的那个荧光就够了，而且我的细胞数不多，是否还需要同时做同型对照？

niwanmao

luoying1983121 发表于 2015-12-11 16:29
老师，你好，我最近在做胞内因子IL10的染色，的确觉得设门有些困难。我开始用的是同型对照，按照我们实验室 ...

做胞内因子的FMO对照即可。如果分群不明显，并且背景较高，还是需要同型对照的。

luoying1983121

niwanmao 发表于 2015-12-11 17:36
做胞内因子的FMO对照即可。如果分群不明显，并且背景较高，还是需要同型对照的。 ...

多谢，老师，我再试一下。

新武器

niwanmao 发表于 2015-3-31 10:57
C门是阴性区域门，B是最高表达的那群阳性细胞，至于高度，问题不是很大。上面示例中因为C门上面有少量非 ...

请问，怎么看出c区域上面是非特异染色的