细胞周期分析疑问

niwanmao

磊子-梦醒十分 发表于 2014-12-8 17:05
倪老师，如果要分析凋亡的话这样红线条圈门也行嘛？

你是指设门？本来就应该如附图的红线圈门啊。

磊子-梦醒十分

niwanmao 发表于 2014-12-8 20:38
你是指设门？本来就应该如附图的红线圈门啊。

谢谢倪老师，如果门圈的大了，会有什么影响吗？

niwanmao

磊子-梦醒十分 发表于 2014-12-9 10:57
谢谢倪老师，如果门圈的大了，会有什么影响吗？

圈大了，就会把右侧的粘连体圈进去，导致G2/M和S期的比例增高。

磊子-梦醒十分

niwanmao 发表于 2014-12-9 12:24
圈大了，就会把右侧的粘连体圈进去，导致G2/M和S期的比例增高。

明白了，谢谢倪老师！

音符小小

倪老师，你好。最近要做细胞周期和 凋亡分析，细胞周期用DAPI染色，70%乙醇固定。从这个帖子上看，一个细胞周期图谱中还可以看出凋亡的多少吗？

niwanmao

音符小小 发表于 2015-1-9 10:09
倪老师，你好。最近要做细胞周期和 凋亡分析，细胞周期用DAPI染色，70%乙醇固定。从这个帖子上看，一个细胞 ...

subG1可以看晚期凋亡细胞比例。如果你确实要区分凋亡，悬浮细胞还是用AV/PI方法，贴壁细胞用TUNNEL和线粒体膜电位等方法。

音符小小

谢谢倪老师，也在群里看了好多相关的帖子。目前实验室凋亡用AV/PI的比较多，其他两种方法还没用过。我的细胞是贴壁细胞，也知道若吹打及胰酶消化均会对细胞产生不利影响，但是这次改了一下胰酶配方，不含EDTA，显微镜下消化，操作也比较轻柔。下午就要上机了，看看结果怎么样。。。最近老板催数据也比较紧。

niwanmao

音符小小 发表于 2015-1-9 10:32
谢谢倪老师，也在群里看了好多相关的帖子。目前实验室凋亡用AV/PI的比较多，其他两种方法还没用过。我的细 ...

消化会对贴壁细胞的AV/PI结果产生严重影响，你可以搜索一下站内，以前很多人提过这种问题。建议改用线粒体膜电位（站内也有资料）或subG1（就是细胞周期的做法）

音符小小

恩，倪老师，我打算用细胞爬片做凋亡检测了，直接拍荧光。上次用学校平台的美天旎的仪器做了流式凋亡及周期分析，但结果不太懂。整理一下打算请教做过的前辈，看看是怎么回事。

niwanmao

音符小小 发表于 2015-1-15 20:17
恩，倪老师，我打算用细胞爬片做凋亡检测了，直接拍荧光。上次用学校平台的美天旎的仪器做了流式凋亡及周期 ...

可以开个帖子把数据传上来看看。