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楼主: heybibna

[细胞周期] 组织酶消化

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发表于 2021-11-12 09:52:57 | 显示全部楼层
heybibna 发表于 2021-11-11 11:10
细胞计数是1×10E7,上流式细胞仪的数量是2w

这样有点浪费细胞的,1000万只取了2万细胞。
从分群看,应该是可以,但是可能你们的仪器产生的数据不太适合Modfit分析。
以后做,可以只用100万细胞试试,让染色充分一点。
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 楼主| 发表于 2021-11-13 08:53:39 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-11-12 09:52
这样有点浪费细胞的,1000万只取了2万细胞。
从分群看,应该是可以,但是可能你们的仪器产生的数据不太适 ...

老师,我之前做的统一上2w细胞,染上7,8千分析的结果可以用吧,我们的仪器是beckman cytoflex s这个仪器,自带的分析软件分析结果必须手动分析,感觉误差比较大。那之后做如果细胞数目太多,我可以稀释成100万,然后体系还是1ml染液吗?
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发表于 2021-11-13 19:26:22 | 显示全部楼层
heybibna 发表于 2021-11-13 08:53
老师,我之前做的统一上2w细胞,染上7,8千分析的结果可以用吧,我们的仪器是beckman cytoflex s这个仪器 ...

统一100万细胞,乙醇固定过夜后,离心去上清,并洗涤一次,然后再加入1ml染液,上机低速获取。
2万个细胞是至少,如果能多获取一些最好。
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 楼主| 发表于 2021-11-15 11:20:28 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-11-13 19:26
统一100万细胞,乙醇固定过夜后,离心去上清,并洗涤一次,然后再加入1ml染液,上机低速获取。
2万个细胞 ...

好的,老师,获取细胞数量多少会对周期结果有影响吗?还是所有样本做到统一就ok?我记得modfit分析, 这个Cell#,指的是用于拟合分析的细胞数,不能少于 10000 个。
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发表于 2021-11-15 16:22:58 | 显示全部楼层
heybibna 发表于 2021-11-15 11:20
好的,老师,获取细胞数量多少会对周期结果有影响吗?还是所有样本做到统一就ok?我记得modfit分析, 这个 ...

一般建议是>2万
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