T细胞分选后激活培养过程中分群问题

tmr

CD45RO/CCR7

CD45RA CCR7

T细胞分选后CD3/CD28磁珠激活 培养，检测T细胞分型状态，发现培养细胞基本全是CD45RA CD45RO双阳细胞，分别结合CCR7逻辑圈门就会得到不同的结果，现在困惑以哪种为准？

niwanmao

在另一个帖回答了。转述如下：

RA和RO散点图上，分化是一个连续的过程，可能你培养的T细胞在刺激后，恰好处于中间阶段。
设门，我个人还是像之前所说的那样，用斜向右上对角线两分法，分出两部分，设门准确位置可参照正常分群清楚的群体设置好，再应用到其它样本上。

CCR7可分别对RA+ 和RO+两群进行分析。

tmr

niwanmao 发表于 2023-7-29 15:53
在另一个帖回答了。转述如下：

RA和RO散点图上，分化是一个连续的过程，可能你培养的T细胞在刺激后，恰好 ...

倪老师，我们做了RA 和RO的散点图，发现激活后培养的细胞基本全部变为了RA RO双阳细胞群体；根据查的文献可能为TSCM细胞，但是这群细胞很大部分的CCR7和CD27又表示阴性，跟TSCM的很多表面marker又是对不上的，现在就是很困惑到底如何定义这这些细胞。倪老师有相关的经验可以指教一下嘛？