找回密码
 加入流式中文网

QQ登录

只需一步,快速开始

查看: 203|回复: 1

[结构和原理] 关于扩散误差SS

[复制链接]
发表于 2024-6-3 20:44:55 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
请问一下怎么去理解这种扩散误差Spillover Spreading error? 能不能说得通俗易懂一些。

既然都可以算出来SS的值是多少,为什么还存在误差呢,一直不太明白。
希望老师能清楚易懂解释一下哈,非常感谢。

组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2024-6-3 21:46:21 | 显示全部楼层

理解溢出扩散
溢出扩散源于检测器在光子计数过程中固有的统计变化。当测量微弱的荧光信号时,由于光子发射和检测的随机性,检测到的光子数量在不同事件之间可能有显著变化。这种变化导致阴性群体信号的扩散或宽度增加,使得从阴性群体中区分出真正的阳性事件变得更加困难。

关于溢出扩散误差的关键点如下:
1. 它是由光子计数的统计变化引起的,而不是由光谱重叠或补偿引起的。[1]
2. 随着荧光强度的增加,溢出扩散误差会增加,因为较亮的信号有更多的光子计数变化。[2]
3. 当使用具有显著光谱重叠的荧光染料组合时,这种误差更为明显,因为荧光渗漏会放大测量误差。[2]
4. 这是流式细胞术的固有局限性,无法完全消除,但可以通过仔细的组合设计和仪器优化来最小化。[1]

计算溢出扩散
虽然无法消除溢出扩散,但可以通过溢出扩散矩阵(SSM)来量化。SSM表示流式细胞仪中每对检测器之间的扩散程度。[2]
SSM是从单染色对照样品计算得出的,并提供了仪器性能和灵敏度的测量。然而,即使知道了SSM值,由于光子计数的统计性质,实际样品中仍然会存在一定程度的溢出扩散误差。


Citations:
[1] https://voices.uchicago.edu/ucflow/2020/03/04/understanding-the-trumpet-effect-how-to-design-aurora-panels-around-spreading-error/
[2] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3678531/
[3] https://wi.mit.edu/sites/default/files/2021-05/20200727_Flow_Post-it_Spreading.pdf
[4] https://www.colibri-cytometry.com/post/identifying-and-fixing-errors-in-flow-data
[5] http://web.mit.edu/flowcytometry/www/Cytometry%20tutorial%20The%20impact%20of%20adjusting%20PMT%20voltages%20on%20spillover%20and%20compensation.pdf
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则 需要先绑定手机号

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2024-6-21 23:04

Powered by Discuz! X3.5

© 2001-2024 Discuz! Team.

快速回复 返回顶部 返回列表