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[结构和原理] 细胞群位置改变

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发表于 2024-6-9 18:40:05 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
测皮下肿瘤的免疫细胞,有2组老鼠 (A组,B组)。Day1杀了A,B组各两只,跑了流式。Day2又杀了A,B组另外两只跑流式

发现Day1的老鼠样本细胞群都偏向 (例如sample 1的位置), 但是Day2细胞群都偏向 (例如sample 2)。
后续分析Ly6c monocytes和F4/80 macrophages的亚群,我发现Day2相对Day1的细胞群也是偏向右。

请问这是什么原因?










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发表于 2024-6-10 13:44:25 | 显示全部楼层
先确认仪器的稳定性(每台仪器都有质控微球)
其次确认染色条件(如抗体量、洗涤力度等)和操作是否稳定(可用前一天的sample1做平行比对)

一般说来,都是操作的问题可能性更大
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 楼主| 发表于 2024-6-10 16:32:03 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2024-6-10 13:44
先确认仪器的稳定性(每台仪器都有质控微球)
其次确认染色条件(如抗体量、洗涤力度等)和操作是否稳定( ...

老师您指的平行比较是什么意思呢,是指比较同一天的样本吗?同一天做的样本位置基本一致,只是不同天做的不一样。
我也觉得应该是操作的问题。 但是不知道到底哪个位置可信。如果圈门位置保持不变,sample1里的F4/80数量少,但是sample2的多
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发表于 2024-6-11 08:46:56 | 显示全部楼层
瓜瓜999 发表于 2024-6-10 16:32
老师您指的平行比较是什么意思呢,是指比较同一天的样本吗?同一天做的样本位置基本一致,只是不同天做的 ...

平行对比,以你上面的为例,你发现前一天sample1的位置是好的,那么第2天做sample2的时候,把sample1也同时再做一次,这就是平行对比,看sample1的位置是跟sample2一样偏掉了?还是跟昨天一样?

如果平行对比两者都偏了,可能性大的还是仪器或者操作中存在不稳定因素,需逐一排查。
如果平行对比时sample1和昨天一样,而sample2偏了,则说明sample2的问题。
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 楼主| 发表于 2024-6-11 16:24:28 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2024-6-11 08:46
平行对比,以你上面的为例,你发现前一天sample1的位置是好的,那么第2天做sample2的时候,把sample1也同 ...

谢谢老师的建议~
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