脾巨噬细胞和中性粒细胞数量太少

sttstt

我做的是脾脏巨噬细胞+中性粒细胞流式检测数量，用的是直接研磨+裂红法获取脾脏单细胞悬液，获取悬液后用1mL 完全1640重悬，然后当天染色上机。
巨噬细胞染的是CD11b、F4/80，中性粒细胞染的是CD11b、LY6G,但是结果是这两个亚群数量太少了，对这个步骤有点疑问，不知道是哪步出了问题。

niwanmao

通常来说，对于从来没做过此类样本，抗体也是头一次用，其实是建议先用小鼠血做一下预试验，确认抗体用量、电压条件等，之后再用在组织样本上

这里看不到你的FSC/SSC分群如何，但至少Ly6G的电压我觉得是很有问题的

sttstt

niwanmao 发表于 2025-2-10 19:22
通常来说，对于从来没做过此类样本，抗体也是头一次用，其实是建议先用小鼠血做一下预试验，确认抗体用量、 ...

我看FSC和ssc是没有问题的

sttstt

niwanmao 发表于 2025-2-10 19:22
通常来说，对于从来没做过此类样本，抗体也是头一次用，其实是建议先用小鼠血做一下预试验，确认抗体用量、 ...

我看挺正常的

sttstt

niwanmao 发表于 2025-2-10 19:22
通常来说，对于从来没做过此类样本，抗体也是头一次用，其实是建议先用小鼠血做一下预试验，确认抗体用量、 ...

老师，有什么改进方法嘛

niwanmao

sttstt 发表于 2025-2-17 17:06
老师，有什么改进方法嘛

你那几个图没有传上来，请回复的时候点击“高级模式”上传

需要看FSC/SSC的细胞组成再看

sttstt

niwanmao 发表于 2025-2-17 17:51
你那几个图没有传上来，请回复的时候点击“高级模式”上传

需要看FSC/SSC的细胞组成再看 ...

好的老师，是这样的图

niwanmao

sttstt 发表于 2025-2-17 19:58
好的老师，是这样的图

有没有试过把门往右移，再看前述标记的表达？

zjjxqsm2008

脾脏的巨噬和中性粒跟外周的类似吗？

sttstt

zjjxqsm2008 发表于 2025-2-17 20:53
脾脏的巨噬和中性粒跟外周的类似吗？

没染过外周血的巨噬和中性粒