精子DFI检测

西柚

niwanmao 发表于 2025-9-8 20:13
首先感觉你们这个液路就有问题，建议先做好仪器的液路质量控制

其次，吖啶橙染料配套试剂的H+浓度很关键 ...

倪老师，我后面换了一个试剂做出来FSC SSC也是这样，仪器我都有CST的，做过其他实验是正常的。我想了想会不会是样本制备的时候有问题呢。精子里面混了其他细胞、精子浓度太低等。

hurunhuan

西柚 发表于 2025-9-18 12:22
倪老师，我后面换了一个试剂做出来FSC SSC也是这样，仪器我都有CST的，做过其他实验是正常的。我想了想会 ...

不同厂家的吖啶橙做出来的结果略有差异，记得做出的结果最经典的是Sigma的吖啶橙，后面Sigma停产之后，测试过其余厂家的吖啶橙，结果都略有差异。有几家纯度特别高的吖啶橙做出的结果跟你图片里的很类似。后面就没有深究，选了跟Sigma跑出的图类似的厂家的。有过推测，可能是吖啶橙里的杂质对于吖啶橙-DNA或者吖啶橙-RNA的结合程度有影响，后面就没有详细研究了。

hurunhuan

西柚 发表于 2025-9-18 12:22
倪老师，我后面换了一个试剂做出来FSC SSC也是这样，仪器我都有CST的，做过其他实验是正常的。我想了想会 ...

看了一下你的图，第一张图出现S形的群很不正常，看看是不是液路/样本管脏了。
另外，看看是不是有补偿，一般跑吖啶橙的时候不用补偿的。
还有，小鼠精子的话，是组织匀浆的话，杂质可能比较多，结果可能不太好。直接从附睾挤出精子来测。