检测结肠炎小鼠TH1/TH17/treg需要刺激吗

hydwl2019

我现在做小鼠结肠炎模型，要检测正常组，模型组和治疗组的淋巴结、脾脏和结肠中的TH1/TH17/treg比例，请问还需要刺激吗还是直接固定破膜测

niwanmao

Th1和Th17细胞通常需要从淋巴结、脾脏和结肠固有层分离细胞，然后在体外用PMA/离子霉素加brefeldin A或monensin刺激4-6小时，以诱导Th1/Th17细胞表达细胞因子，然后通过细胞内细胞因子染色分析（例如，用IFN-γ识别Th1，用IL-17A识别Th17）

Treg可以直接进行固定/破膜而不需刺激，用表面CD4和CD25标记结合细胞内转录因子FoxP3染色

蓝斌

niwanmao 发表于 2025-9-22 13:33
Th1和Th17细胞通常需要从淋巴结、脾脏和结肠固有层分离细胞，然后在体外用PMA/离子霉素加brefeldin A或mone ...

老师，请问倘若不染CD25，只染CD4后固定破膜染Fxop3合理吗

niwanmao

蓝斌 发表于 2025-9-22 21:39
老师，请问倘若不染CD25，只染CD4后固定破膜染Fxop3合理吗

不合理的，CD25需要的

蓝斌

niwanmao 发表于 2025-9-22 22:02
不合理的，CD25需要的

好的，谢谢老师

小能手

niwanmao 发表于 2025-9-22 13:33
Th1和Th17细胞通常需要从淋巴结、脾脏和结肠固有层分离细胞，然后在体外用PMA/离子霉素加brefeldin A或mone ...

老师，如果同时存在foxp3和IL17，使用固定破膜剂选择哪种比较好？赛默飞的试剂kit还是说用4%多聚甲醛配合赛默飞的破膜液？

niwanmao

小能手 发表于 2025-10-17 09:17
老师，如果同时存在foxp3和IL17，使用固定破膜剂选择哪种比较好？赛默飞的试剂kit还是说用4%多聚甲醛配合 ...

分开测吧

小能手

niwanmao 发表于 2025-10-17 10:04
分开测吧

嗯嗯，谢谢您

麦小光

个人的使用感受是invitrogen的FOXP3破膜液最好用，现在收购到thermo旗下了

CLL17819811784

niwanmao 发表于 2025-10-17 10:04
分开测吧

老师您好，学生是做EAE模型，流式面临细胞因子和转录因子一起测，脊髓细胞很少，所以分开测怕测不到，请问可以穿核和穿胞一起测吗？有什么好的建议给我吗？查了好多资料，没有好的办法解决这个问题