外周血B细胞出现CD3+CD19+亚群

替替

各位老师好:) 近期遇到一个流式B细胞检测问题，使用的是外周血先裂解后染色的操作步骤，裂解时间和转速按照裂解液说明书进行，使用抗体为CD45-V525，CD3-R712，CD19-B690，死活-R780，仪器为贝克曼流式细胞仪Cytoflex，设门逻辑是：去黏连→圈死活→圈CD45+→CD3/CD19圈B细胞，图二是之前做的，补偿和电压等参数都没有变，结果看起来没什么问题，但是这次上机（图一）就三个样本都出现一样的问题，本人流式小白，实在搞不清楚原因，向各位老师请教这是什么情况？该如何处理呢？

近期出现问题的图

之前的图

niwanmao

R712、R780、B690之间的补偿，请逐一确认

替替

niwanmao 发表于 2025-10-24 09:06
R712、R780、B690之间的补偿，请逐一确认

谢谢倪老师~我是在flowjo上面直接拉了之前调好的补偿，不是在上机模板上调的，这样的话我还能接着调吗？只调这几个样本的？

Merci

把原始数据发出来，调调补偿看一下

ZRX

替替 发表于 2025-10-24 09:48
谢谢倪老师~我是在flowjo上面直接拉了之前调好的补偿，不是在上机模板上调的，这样的话我还能接着调吗？ ...

可以的  你也可以直接在自己电脑上装一个CytExpert软件。慢慢自己调整一波

ZRX

我之前做一直会看到一点点的CD3+CD19+双阳细胞，也不看这部分细胞就不管