小鼠外周血Treg检测

ZRX

我之前做这种连续采血（每隔三天）的话都是眼内眦（我同事取的，需要手法非常娴熟）100μl,三周内老鼠状态很好，直接把血取到抗凝管中，100μl血加1ml裂红液（BD那款）千万不要在冰上裂红，室温裂红10min或者15min,足够了。然后死活，表染，然后是固定破膜（要选好试剂，THERMO的FOXP3固定破膜试剂盒就可以，BD的那款我做下来感觉不如thermo），然后核内染呗。上机的时候200重悬，全部上完。看你的细胞非常少，小鼠尾巴如果不干净的话,裂红不太会好

Seven_Teen

tiger 发表于 2025-12-22 16:23
CD45/3/4/8/25/127，血50UL，裂解液0.5ML，不洗直接上机，效果杠杠的。如用Foxp3,则用Foxp3替代CD127，需 ...

你染的好好啊，请问不洗直接上机的意思是取完血直接裂红，然后离心，重悬就直接上机了嘛？

Seven_Teen

ZRX 发表于 2025-12-23 17:50
我之前做这种连续采血（每隔三天）的话都是眼内眦（我同事取的，需要手法非常娴熟）100μl,三周内老鼠状态 ...

好的！我试试常温裂红，谢谢！

ZRX

Seven_Teen 发表于 2025-12-23 19:53
你染的好好啊，请问不洗直接上机的意思是取完血直接裂红，然后离心，重悬就直接上机了嘛？ ...

这种也行，如果是要染FOXP3的话，血直接染色，然后直接固定破膜，毕竟固定破膜也算是一种裂红

tiger

Seven_Teen 发表于 2025-12-23 19:53
你染的好好啊，请问不洗直接上机的意思是取完血直接裂红，然后离心，重悬就直接上机了嘛？ ...

不用FOXP3的话，裂红后不离心，直接上机。