请老师帮忙分析我的两次凋亡检测结果

vetzcm

stef1981 发表于 2011-12-12 08:56

                               
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就常规的处理方法，0.25%的胰酶消化，显微镜下观察形态，不要消化过了，多吹几下，不过纱网，洗一次，加 ...

谢谢斑竹的指点！

zhangjianhong

niwanmao 发表于 2011-12-11 15:08

                               
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1、HepG2是贴壁细胞，可以消化，也可以使用细胞刮匙把细胞刮下来。建议你可以试试。
2、Q2＋Q4就怕你到时 ...

倪老师，这究竟能不能用Q2+Q4总的百分比来表示凋亡率呢？我之前做了很多的凋亡。这个问题我疑惑了很久。这相关的文献报道不一样。

niwanmao

zhangjianhong 发表于 2011-12-14 20:53

                               
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倪老师，这究竟能不能用Q2+Q4总的百分比来表示凋亡率呢？我之前做了很多的凋亡。这个问题我疑惑了很久。 ...

最好不要。最好只用AV单阳的那群

兔子赵

stef1981 发表于 2011-12-11 16:02

                               
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空白和低浓度的凋亡都很高，说明细胞处理有问题，操作上对细胞损伤太大了
我们做的大部分癌细胞、贴壁培养 ...

非常同意这个说法！最佳样本还是悬浮培养细胞。
记得有一次BD一个技术支持也提到过贴壁细胞做AV/PI双染的问题，他对此也有疑问。
可能是消化对膜的损伤会影响AV与PS的结合

stef1981

用AV-PE和7-AAD双染的方法，还是能区分凋亡细胞和坏死细胞
正常细胞

正常细胞

凋亡细胞多的细胞

晚期凋亡多

坏死细胞多的细胞

坏死细胞多

shen_coco

stef1981 发表于 2011-12-15 16:01

                               
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用AV-PE和7-AAD双染的方法，还是能区分凋亡细胞和坏死细胞
正常细胞

图-3算是晚期凋亡吗？为什么没有早期凋亡就直接进入晚期凋亡了呢？发文章这种图片编辑会承认吗？

niwanmao

shen_coco 发表于 2011-12-16 21:13

                               
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图-3算是晚期凋亡吗？为什么没有早期凋亡就直接进入晚期凋亡了呢？发文章这种图片编辑会承认吗？ ...

图3这群7-AAD单阳性的应该属于坏死细胞，一般晚期凋亡不太说了。

PompyJohn

为什么正常细胞图里AV+和AAD+象限里也有细胞呢

vetzcm

PompyJohn 发表于 2011-12-20 22:18

                               
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为什么正常细胞图里AV+和AAD+象限里也有细胞呢

嗯，我也觉得不正常啊 可能机器的问题 没调好

vetzcm

兔子赵 发表于 2011-12-15 14:12

                               
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非常同意这个说法！最佳样本还是悬浮培养细胞。
记得有一次BD一个技术支持也提到过贴壁细胞做AV/PI双染的 ...

我们用的HepG2细胞是贴壁细胞，怎么悬浮培养呢？