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楼主: gcz5340

[结构和原理] 样本速度和鞘流速度到底哪个快?

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发表于 2012-4-10 14:43:47 | 显示全部楼层

也有道理,不过关键是所谓的速度是指哪个地方的速度,检测去的速度还是两种液体混合前的速度。还有个问题,一般来说样品流率可调,而鞘液流率不可调,假设样品流速高于鞘液流速的话,细胞通过激光检测区的速度就由样品流率决定,调节样品流率时荧光参数W是否应该会改变呢?
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发表于 2012-4-12 10:05:18 | 显示全部楼层
haven_t 发表于 2012-4-10 14:43
也有道理,不过关键是所谓的速度是指哪个地方的速度,检测去的速度还是两种液体混合前的速度。还有个问题 ...

从这篇文章来看,应该是鞘液速度可调,说明平时调的HIGH、MEDIUM、LOW,我们平时常用的机器都是利用鞘液流带动样本。
http://www.theflowguy.com/Fluidics.php

This fast flowing sheath produces a huge drag effect on the core chamber, this drag leads to the dispersed sample to be pulled into alignment; this effect is known as hydrodynamic focusing. In this jet-in-air flow chamber, once aligned the sheath and the sample are forced parallel out of the flow chamber under laminar flow conditions ready to be interrogated as they flow past the light source.
In laminar flow the sample and sheath do not actually mix (well, on some ionic level as seen with PI staining, but for practical purpose we can say they do not mix). The difference between the sample and sheath pressure is known as the sample differential. The greater the sample differential the faster the sample will flow in to the flow chamber, this will increase the event rate, or number of cells interrogated in any given time. The speed at which the sample is forced into the flow chamber is known as the flow rate. How well aligned the cells are when delivered to the interrogation zone depends on the flow rate! If you look at the diagram below, the X shows the spot where you want to pass a cell. You can see, at slower flow rates the inner "core" sample stream is small so cells are reproducibly passed through this point.

                               
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发表于 2012-4-12 11:55:50 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2012-4-12 10:05
从这篇文章来看,应该是鞘液速度可调,说明平时调的HIGH、MEDIUM、LOW,我们平时常用的机器都是利用鞘液 ...

我对以上文字的理解是高速流动的鞘流在Core chamber中产生拉力,使细胞形成单个的队列。这里的Core chamber应该是指进样针口到喷嘴的那个空间。平时调的进样速度不是鞘液产生的,虽然从流体力学角度高速流动的液体能产生负压,很多真空泵也是用这个原理。但是进样的主要动力应该是样品管里的正压,因为当样品管漏气的时候不能进样。
鞘液速度应该是可调的,但这个功能不应该开放给终端用户。原因正如我前面所说的,荧光参数有AHW,其中W是脉冲的峰宽,如果流速改变,细胞通过检测区的时间就会改变,脉冲的宽度也会改变,甚至A也会改变。所以我觉得设计者应该会尽力让检测区液流的流速保持稳定,不会随意让用户调节流速的。
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发表于 2012-4-12 13:10:41 | 显示全部楼层
应该是鞘液吧 ,是鞘液带着样品通过激光器的
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发表于 2012-4-12 17:18:11 | 显示全部楼层
haven_t 发表于 2012-4-12 11:55
我对以上文字的理解是高速流动的鞘流在Core chamber中产生拉力,使细胞形成单个的队列。这里的Core chamb ...

嗯,还是你理解的对,调节的HI/LOW/MED是样本的压力,鞘液的压力是不变的。
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 楼主| 发表于 2012-4-27 23:24:40 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2012-4-12 17:18
嗯,还是你理解的对,调节的HI/LOW/MED是样本的压力,鞘液的压力是不变的。 ...

分选型的流式细胞仪的鞘液压力是可以调节的,大的喷嘴需要用小一点的压力。
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 楼主| 发表于 2012-4-27 23:26:45 | 显示全部楼层
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21.  The sample gets injected into the flow cell because
a)  sheath pressure is higher than sample pressure
b)  sample pressure is higher than sheath pressure
c)  sheath contains detergent
d)  sheath contains sodium ions


The answer is A.
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发表于 2012-4-28 05:59:34 | 显示全部楼层
gcz5340 发表于 2012-04-27 23:24:40
[quote]niwanmao 发表于 2012-4-12 17:18 [url=forum.php?mod=redirect&go

ok,又学到了点知识,看来得找台分选型的流式好好学学
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发表于 2012-4-28 06:04:17 | 显示全部楼层
gcz5340 发表于 2012-04-27 23:26:45
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21.  The sample gets injected into the flow cell because
a)  s

有没有问过老外,是不是即使分选型流式调节鞘液再大,也超不过样本压力?
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发表于 2012-4-28 10:44:23 | 显示全部楼层
gcz5340 发表于 2012-4-27 23:24
分选型的流式细胞仪的鞘液压力是可以调节的,大的喷嘴需要用小一点的压力。 ...

从来没有换过孔径不同的喷嘴,所以没想过这种情况。其实也是正确的,喷嘴大了,要保证液流通过激光的速度不变的话就只能够加大压力了,所以我猜测,某一特定的喷嘴只能使用与其相对应的压力,不能随意调节,不知道我的猜测是否正确呢?
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