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楼主: 20071271

[功能检测] NK细胞杀伤靶细胞丢失

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发表于 2013-5-10 14:11:29 | 显示全部楼层

你是横坐标CFSE、纵坐标PI?
CSFE染的少,说明你的靶细胞少,但是按照你所说的,你刚开始加进去的靶细胞量应该是差不多的,最后检测出来的比例却低的离谱,所以你就搞不明白其中原因,是这个意思吧?
我建议你再把FSC、SSC图放出来看看,FSC、SSC设门有没有问题,有没有把碎片或其它非特异性信号圈进去。
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 楼主| 发表于 2013-5-10 18:45:07 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2013-5-10 14:11
你是横坐标CFSE、纵坐标PI?
CSFE染的少,说明你的靶细胞少,但是按照你所说的,你刚开始加进去的靶细胞 ...

横坐标是CFSE
对,靶细胞是差不H多的(在80以前)。最后检测出来,在E:T达到80时,靶细胞却很少
门都一样。
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发表于 2013-5-10 20:02:14 | 显示全部楼层
20071271 发表于 2013-5-10 18:45
横坐标是CFSE
对,靶细胞是差不H多的(在80以前)。最后检测出来,在E:T达到80时,靶细胞却很少
门都一 ...

建议你把FSC/SSC点图放出来看看,如果你后面的门圈中了大量碎片,就可能导致靶细胞比例明显减少,另外,随着你效靶比的增高,靶细胞比例本来就减少,两个因素综合起来,所以靶细胞比例就越来越少。
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 楼主| 发表于 2013-5-10 21:17:33 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2013-5-10 20:02
建议你把FSC/SSC点图放出来看看,如果你后面的门圈中了大量碎片,就可能导致靶细胞比例明显减少,另外, ...

误会了。我收集的是events(CFSE+),按照数量来收集的
而且,我圈碎片和不圈碎片,都一样,events(CFSE+)数量几乎没变化(可能碎片也不能染上CFSE)
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发表于 2013-5-10 22:36:01 | 显示全部楼层
20071271 发表于 2013-5-10 21:17
误会了。我收集的是events(CFSE+),按照数量来收集的
而且,我圈碎片和不圈碎片,都一样,events(CFSE ...

按照CFSE+收集?你收集的时候只获取CFSE+的细胞?你将原始数据传上来,一看就清楚了。
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 楼主| 发表于 2013-5-11 10:43:26 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2013-5-10 22:36
按照CFSE+收集?你收集的时候只获取CFSE+的细胞?你将原始数据传上来,一看就清楚了。 ...

我先圈门(按照CFSE对照-没加效应细胞,圈)。
然后收集cfse+。
EVENTS在80以前都收集Q3(10000),80的时候跑完也不到10000.
原始数据太大

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发表于 2013-5-11 12:36:06 来自手机 | 显示全部楼层
20071271 发表于 2013-05-11 10:43:26


我先圈门(按照CFSE对照-没加效应细胞,圈)。
然后收集cfse+。
EVENTS在80以前都收集Q3(10000),80的时

但是从你这些结果图片看肯定收集了所有细胞,否则你图片中那些cfse阴性的哪来的 :)
原始细胞可以通过压缩上传。
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发表于 2013-6-13 17:26:03 | 显示全部楼层
靶细胞为什么不用K562,是因为做的小鼠?小鼠的细胞LZ是从哪里买的?还是找人要的?
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发表于 2013-6-14 08:51:39 | 显示全部楼层
dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-13 17:26
靶细胞为什么不用K562,是因为做的小鼠?小鼠的细胞LZ是从哪里买的?还是找人要的? ...

靶细胞的选择确实跟他们做的实验种类有关。
小鼠的细胞来源需要 @20071271   
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