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楼主: 小小研究生

[凋亡检测] JC-1 图形太不正常

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 楼主| 发表于 2015-6-9 23:13:22 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-6-9 19:17
JC-1你买的是粉剂吗?用什么东西溶解的?

用的是DMSO,自己配置
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发表于 2015-6-10 08:28:01 | 显示全部楼层
调一下补偿试试,能不能通过补偿把斜线拉平来?如果能拉平,则看看各组的X-mean或Y-mean值是否下移,即FL1绿色荧光增强(凋亡早期细胞内JC-1不能聚集在线粒体的基质中,为单体,细胞则呈绿色较多)说明细胞线粒体膜电位下降,凋亡增多
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发表于 2015-6-10 16:54:34 | 显示全部楼层
小小研究生 发表于 2015-6-9 23:13
用的是DMSO,自己配置

JC-1的配制请参见:http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-200-1-1.html

染色方法参见:http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-191-1-1.html

您对比一下看看,是否哪一步出问题了。
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 楼主| 发表于 2015-6-11 11:05:26 | 显示全部楼层
人间天堂 发表于 2015-6-10 08:28
调一下补偿试试,能不能通过补偿把斜线拉平来?如果能拉平,则看看各组的X-mean或Y-mean值是否下移,即FL1 ...

调了补偿,虽然不完美,但能用。
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 楼主| 发表于 2015-6-11 11:06:18 | 显示全部楼层
人间天堂 发表于 2015-6-10 08:28
调一下补偿试试,能不能通过补偿把斜线拉平来?如果能拉平,则看看各组的X-mean或Y-mean值是否下移,即FL1 ...

FL1增强的同时,FL2也有一点点增强。。。
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 楼主| 发表于 2015-6-11 11:07:08 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-6-10 16:54
JC-1的配制请参见:http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-200-1-1.html

染色方法参见:http://www.flowcyt ...

是补偿没调的原因。稍微调了补偿,图形就拉开了
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发表于 2015-6-11 13:57:20 | 显示全部楼层
小小研究生 发表于 2015-6-11 11:07
是补偿没调的原因。稍微调了补偿,图形就拉开了

哦,解决了就好。按道理我们以前做补偿没调也不会这个样子。
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发表于 2015-6-12 09:51:29 | 显示全部楼层
{:soso_e113:}{:soso_e113:}{:soso_e113:}
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发表于 2015-6-18 15:56:06 | 显示全部楼层
杀小鼠直接采集的卵泡细胞,上机检测时图形感觉很奇怪,麻烦各位大侠帮忙看一下,第一次做JC-1,望各位老师给点意见!
Data.001.PNG
FSC-H,_SSC-H_subset.PNG
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发表于 2015-6-18 20:07:10 | 显示全部楼层
happydemon12 发表于 2015-6-18 15:56
杀小鼠直接采集的卵泡细胞,上机检测时图形感觉很奇怪,麻烦各位大侠帮忙看一下,第一次做JC-1,望各位老师 ...

补偿感觉需要再加大一些。
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