naive T诱导iTreg

niwanmao · 发表于 2016-5-4 08:20:01

暖希贤发表于 2016-5-3 09:20
老师能否帮忙分析一下做个示范？怎么通过Time坐标去掉呢？

切换到Time坐标，看来这类信号不是因为细胞取光之后造成的假信号，而是全程都有的，怀疑可能是不是细胞死亡后的碎片。
因为不知道你用了哪几个抗体，不知道是不是用了CD4、CD25、CD127？所以大致这么圈，你看看是不是？
屏幕快照 2016-05-04 上午8.17.23.png

暖希贤 · 发表于 2016-5-4 08:44:21

老师，我是用的CD4-FITC CD25-APC PE-foxp3，是第一个图里的绿色框里的都圈上么？我分析出的比例很低，只有百分之2左右

niwanmao · 发表于 2016-5-4 08:54:51

暖希贤发表于 2016-5-4 08:44
老师，我是用的CD4-FITC CD25-APC PE-foxp3，是第一个图里的绿色框里的都圈上么？我分析出的比例很低，只 ...

那怎么CD4没有阳性？

暖希贤 · 发表于 2016-5-5 16:31:09

niwanmao 发表于 2016-5-4 08:54
那怎么CD4没有阳性？

老师，左边的图没标东西的，右边的图就是上传的这个样本的，这样不算染上CD4-FITC么？看着是往右边移动了

niwanmao · 发表于 2016-5-5 18:15:49

暖希贤发表于 2016-5-5 16:31
老师，左边的图没标东西的，右边的图就是上传的这个样本的，这样不算染上CD4-FITC么？看着是往右边移动了 ...

这样不能算吧，难道全部都是CD4＋？

小憨 · 发表于 2016-5-5 21:11:03

这是人的标本还是鼠的？我记得人的CD4 T细胞活化后CD4会被内吞造成该群细胞标记不上，所以一般都是圈CD3+CD8-的细胞作为CD4+ T细胞群。

Victorrwang · 发表于 2016-5-6 12:25:14

本帖最后由 Victorrwang 于 2016-5-6 12:28 编辑

小憨发表于 2016-5-5 21:11
这是人的标本还是鼠的？我记得人的CD4 T细胞活化后CD4会被内吞造成该群细胞标记不上，所以一般都是圈CD3+CD ...

对于这种情况，也有protocol建议先染cd4再做stim

暖希贤 · 发表于 2016-5-6 16:24:03

niwanmao 发表于 2016-5-5 18:15
这样不能算吧，难道全部都是CD4＋？

老师，不可能大部分是CD4+么？我这个本来就是分离的CD4+t细胞

暖希贤 · 发表于 2016-5-6 16:25:42

小憨发表于 2016-5-5 21:11
这是人的标本还是鼠的？我记得人的CD4 T细胞活化后CD4会被内吞造成该群细胞标记不上，所以一般都是圈CD3+CD ...

人的标本，我没用PMA刺激，我是用的CD3/CD28，这个应该不会引起CD4内吞吧？

暖希贤 · 发表于 2016-5-6 16:28:17

Victorrwang 发表于 2016-5-6 12:25
对于这种情况，也有protocol建议先染cd4再做stim

能具体讲一下么？谢谢

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