PMA刺激T细胞后分泌IFN-γ，检测不到TNF-α

hellzhu

Jing310 发表于 2016-12-26 09:46
1 我只是用了PMA和离子霉素；
2 下次我再缩短时间到5-6小时看看，浓度那个买来是250X的
3 我加了阻断剂， ...

您好！请问加BFA时间节点的依据是什么呢？我看一些相关的报道，BFA有一定的细胞毒性，不知道应该在什么时间点加呢。请问您是参考了那篇文献的呢？可否分享一下？感谢！

niwanmao

hellzhu 发表于 2020-1-19 21:09
您好！请问加BFA时间节点的依据是什么呢？我看一些相关的报道，BFA有一定的细胞毒性，不知道应该在什么时 ...

BFA可以和PMA一起加进去。浓度是需要自己先按照做的细胞类型，摸索一个最佳浓度。

张你你

楼主有试过PMA和iono以及BFA、莫能霉素阻断剂一起处理4h吗？可以测出来不？
而且我的是只能测到TNF-α的表达，IFN-γ和GZMB测不出来

niwanmao

张你你 发表于 2025-3-27 18:07
楼主有试过PMA和iono以及BFA、莫能霉素阻断剂一起处理4h吗？可以测出来不？
而且我的是只能测到TNF-α的表 ...

参考：
PMA/离子霉素刺激检测Th1和Th17，含CD4下调机制和解决办法
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6801-1-1.html
(出处: 流式中文网)


此外，关注刺激前的细胞状态