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请教一下,这幅图各个参数 选项各代表什么

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发表于 2017-8-18 11:26:06 | 显示全部楼层 |阅读模式

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做流式不太会看这张图,请高手教教,说说各项含义,以及如何正确使用这个常用网站。
这个网站最主要是看补偿的吧~

如何分析这张图啊

如何分析这张图啊
发表于 2017-8-18 17:25:13 | 显示全部楼层
老铁,很简单。以APC为例。fluorochrome指荧光颜色。EX是它的激发光谱,在它的最高点的那个黄色的框是指最佳激发波长。EM是发射光波谱,最高点的那个框是指检测波段。Filters是指滤光片,660/20是带同滤片(banpass,650nm-670nm,即660±10)。最后的框子里面或许是建议你他们间的互相补偿值吧。
这个工具的作用就是直观的告诉你,两个荧光在某个流式仪的检测滤片条件下,他们是否有补偿以及补偿的程度如何。当然,工具虽好,一切还是要看实际情况的。

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 楼主| 发表于 2017-8-21 15:37:17 | 显示全部楼层
我想成大牛 发表于 2017-8-18 17:25
老铁,很简单。以APC为例。fluorochrome指荧光颜色。EX是它的激发光谱,在它的最高点的那个黄色的框是指最 ...

想再请教一下,这里的两种荧光素APC和Texas Red,他们的最佳激发光发别是多少图上有显示吗?还有我看APC有630/22和660/20这是指,可分别有这两组滤光片来收集APC的荧光信号吗?but 我看最好的吸收峰顶在660那里呢。请解释一下谢谢
发表于 2017-8-22 14:58:13 | 显示全部楼层
lgfffancy 发表于 2017-8-21 15:37
想再请教一下,这里的两种荧光素APC和Texas Red,他们的最佳激发光发别是多少图上有显示吗?还有我看APC ...

一般激发光是虚线表示,最高峰就是最佳激发波长,但是,一个流式仪配置的激光器不可能发出所有荧光的最佳激发光,所以,很多时候荧光的激发光都是在最高峰附近,不一定是最高峰。
至于APC的检测波段是根据你使用的流式仪配置的滤光片决定的,数值并不是随便确定的。
在这两种滤光片中,肯定是660/20更好,因为它的检测范围(即曲线下面积)包含了APC信号最多的部分。630/22可能是检测其他荧光的滤片。
具体的你可以查看流式仪软件里面的cytomer信息,一般都会提供仪器中配置的检测通路及滤光片组合。
 楼主| 发表于 2017-8-22 15:44:46 | 显示全部楼层
我想成大牛 发表于 2017-8-22 14:58
一般激发光是虚线表示,最高峰就是最佳激发波长,但是,一个流式仪配置的激光器不可能发出所有荧光的最佳 ...

恩恩,最后再问一句哈,这个图上我只看到一个激发光640nm,它荧光时APC的激发光,那Texas-Red的激发光好像看不到,在哪里看啊
发表于 2017-8-22 15:58:10 | 显示全部楼层
https://www.biolegend.com/spectraanalyzer 你可以用biolegend的工具。
Texas-Red和PE的激发光差不多,要么是488绿色激光器激发,要么是561黄绿色激发器激发。你可以调最上面那个640旁边的下拉菜单,换成488.
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