小鼠脾脏淋巴细胞亚型相关问题

zaqwer

niwanmao 发表于 2018-11-3 09:33
CD3的用量再做个梯度，如果每个梯度都无法分开，说明确实是抗体荧光素弱的问题。
不过目前这个图基本可用 ...

您的意思是继续提高抗体的浓度，做一个CD3抗体的梯度，其他抗体不用改变是这样吗？谢谢老师

niwanmao

zaqwer 发表于 2018-11-5 12:01
您的意思是继续提高抗体的浓度，做一个CD3抗体的梯度，其他抗体不用改变是这样吗？谢谢老师 ...

往高和往低各做几个梯度。主要是CD3，其它几个抗体分群好。

ghqiu09

zaqwer 发表于 2018-11-1 22:25
那请问前辈需要做密度梯度离心提取淋巴细胞么？还是裂红后直接加阻断抗体然后孵育CD3/CD4/CD8抗体呢？您 ...

需不需要提取淋巴细胞看你的实验需求，如果只是分析脾脏中CD4/CD8的比例和总数，你就破红后计数，然后根据比例算绝对数。20%的那个比例是研磨破红后得到的比例