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[淋巴细胞相关] 关于斜角细胞和细胞死亡问题

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 楼主| 发表于 2021-1-25 21:36:52 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
本帖最后由 半年y 于 2021-1-25 21:42 编辑

各位老师大家好。
1. 想请问一下大家,这个大斜角是什么,阴性管也是如此,并且只在这两个通道间有特别大的斜角。样本是脾脏细胞,刺激四个半小时,但考虑不是死亡细胞的问题,因为如果把配伍换掉,不会出现这样的问题。
2. 一二图是不同天样本的同样处理的散点图,所有通道的电压都是一致的,为什么第二张图的FITC和Bv510这么飘?而且分团不如之前那么清楚?当时上样本的时候就发现这个问题了,但是怎么调整,洗机器,也没办法改变,所以只能收了。想请问老师们,如果我想做动态比较,现在很明显不可以使用同一个门了,那我是否还能进行比较?
3. 还有就是做MDSC细胞,只圈7AAD的阴性部分会导致没有MDSC细胞,对各个位置进行了反设门。发现CD11b+Gr-1+主要在7AAD阳性靠上的这一团里,已经调过补偿了,这是为什么呢?也不可能只死亡MDSC细胞吧? 烦请各路大神解答一下。

斜角细胞

斜角细胞

相同电压,不同位置

相同电压,不同位置

这次的配伍

这次的配伍

之前的配伍

之前的配伍

反设门

反设门

反设门

反设门

反设门

反设门

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1和2的问题,可能会与仪器状态有关,你这台仪器使用时间、日常保养和维护是怎么样的。目前从图形看,这样的分布,是问题不大的,你到时候不用十字门,而是分别用不规则门圈CD4+和CD8+的信号即可,因为分群非常好,不用担心。 至于3这个问题,其实你后面圈的7-AAD弱表达部分,是可以圈进去的,只有7-AAD高表达的那部分才是肯定死亡的。 ...
发表于 2021-1-25 21:36:53 | 显示全部楼层
1和2的问题,可能会与仪器状态有关,你这台仪器使用时间、日常保养和维护是怎么样的。目前从图形看,这样的分布,是问题不大的,你到时候不用十字门,而是分别用不规则门圈CD4+和CD8+的信号即可,因为分群非常好,不用担心。

至于3这个问题,其实你后面圈的7-AAD弱表达部分,是可以圈进去的,只有7-AAD高表达的那部分才是肯定死亡的。
 楼主| 发表于 2021-1-26 19:34:57 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-1-26 08:11
1和2的问题,可能会与仪器状态有关,你这台仪器使用时间、日常保养和维护是怎么样的。目前从图形看,这样的 ...

十分谢谢老师,感谢老师的回答。老师您可以看到,7AAD在FSC-H上分上下两团,我反设门了下面这一团发现基本上是斜角细胞,请问老师这群还需要圈吗?
发表于 2021-1-26 20:52:03 | 显示全部楼层
半年y 发表于 2021-1-26 19:34
十分谢谢老师,感谢老师的回答。老师您可以看到,7AAD在FSC-H上分上下两团,我反设门了下面这一团发现基 ...

SSC过小的(小于淋巴细胞),无论7-AAD强弱,都不要。
 楼主| 发表于 2021-1-27 17:24:47 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-1-26 20:52
SSC过小的(小于淋巴细胞),无论7-AAD强弱,都不要。

好的 谢谢老师
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