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楼主: jnutsq

[结构和原理] 流式荧光值为负数

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 楼主| 发表于 2021-7-1 15:54:15 | 显示全部楼层
ghqiu09 发表于 2021-6-19 12:23
荧光值和电压有关系,电压越小,荧光值越低。

谢谢,我再去多学习一下相关知识!
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发表于 2023-4-4 00:29:44 | 显示全部楼层
我也纳闷了,总算是搞清楚了
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发表于 2023-4-4 10:47:39 | 显示全部楼层
PMT本身检测到的信号都是正值,也就是只有没检测到信号(=0)和检测到信号(>0)两种情况,但是后续电子分析系统在处理数据的时候会产生小于0的负值。如果补偿值过大,那么主通道的荧光信号就会小于0,会出现图形不正常(不是横平竖直,可通过调整补偿值消除)。而在在补偿正确的情况下,产生负值的原因主要有两方面,一是spreading error(会出现鱼尾一样的图形,无论怎么调补偿值都不能消除),二是背景信号(电子噪音)扣除。另外,流式细胞术的结果分析时,荧光强度只有相对意义,也就是只能比较谁强谁弱(同一台仪器同一批次实验),而荧光强度的绝对值没有意义,也就是说不能按照这个值来对比分析不同仪器不同批次实验的荧光强度。

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