请教各位老师关于染5色分组的问题

niwanmao

Noddy 发表于 2017-5-22 10:18
倪老师您好，我这个检测有4个实验分组，每组5个样本。然后我想问您这种FMO对照是每个样本都设置?还是说样 ...

同类样本，用同样的抗体，可以只设一个FMO对照，除非样本经过实验处理后，状态和颗粒度发生很明显的变化。

whimsyhui

想请教老师，我想做心肌炎小鼠血液中炎症细胞的分析，分组如下图。组一是为了分m1,m2型巨噬细胞,中性粒细胞。
组二是分Treg。
组三分Th1,Th2,Th17。
组四分Th,Tc,NK,NKT,B细胞。



实验每组设一个空白+每个抗体各一个单标+两个样品，请问这样分组和设计可以吗？有没有更好的建议呢？

niwanmao

whimsyhui 发表于 2019-2-28 21:53
想请教老师，我想做心肌炎小鼠血液中炎症细胞的分析，分组如下图。组一是为了分m1,m2型巨噬细胞,中性粒细胞 ...

这些都是分群良好的标记，可以直接做。

whimsyhui

niwanmao 发表于 2019-2-28 22:14
这些都是分群良好的标记，可以直接做。

好的，谢谢老师

whimsyhui

niwanmao 发表于 2019-2-28 22:14
这些都是分群良好的标记，可以直接做。

老师，我这次按上面的分组做的流式，但是pecy7和pe补偿非常大，如下图。


调补偿完全调不回来。但是这个配色之前也有人做过，也没有这么大的补偿，我想请问老师这种情况跟机器有关系吗？如果我要换掉pecy7，换成什么比较好呢？还有因为我需要计算这些细胞在白细胞中的比例，所以在考虑每组都加一个cd45，那样就需要做六色，老师有什么好的建议吗？

niwanmao

whimsyhui 发表于 2019-3-9 08:55
老师，我这次按上面的分组做的流式，但是pecy7和pe补偿非常大，如下图。

CD3分群都没分开，建议滴定好浓度，使CD3单标能够充分分开的量，再去做实验，可以让补偿调得更好。

whimsyhui

niwanmao 发表于 2019-3-9 09:35
CD3分群都没分开，建议滴定好浓度，使CD3单标能够充分分开的量，再去做实验，可以让补偿调得更好。 ...

那老师 如果我需要加一个配色呢？bv605可以吗

niwanmao

whimsyhui 发表于 2019-3-9 09:46
那老师 如果我需要加一个配色呢？bv605可以吗

可以的，不过，加上BV605，得再调整Ly6G与BV605之间的补偿了