小鼠肿瘤浸润淋巴细胞

如果有人呼唤

忞勣的FACS 发表于 2022-10-9 14:31
1、固定破膜后，细胞变小，所以离心力应该加大，600g，5min
2、活细胞比例明显降低，是用什么染料判断细胞 ...

谢谢您的解答！我现在离心力加大到600g，8min依然没有很好的结果。我用的是BD的Fixable Viability Dye 染料，先表染，破膜后染foxp3和Ki67。
现在在用小鼠脾脏摸条件，发现破膜之后细胞都不分群了，由图1变成了图2。
因为以前做人外周血PBMC结果很好，所以怀疑是破膜剂不适合这个小鼠这个种属，换用了赛默飞的破膜剂结果依然不好。不知道是不是因为抗体和破膜剂不兼容。

忞勣的FACS

如果有人呼唤 发表于 2022-10-16 12:57
谢谢您的解答！我现在离心力加大到600g，8min依然没有很好的结果。我用的是BD的Fixable Viability Dye 染 ...

我做的是大鼠Treg，用Foxp3 Transcription Factor Staining Buffer Set（00-5523-00）固定破膜剂，很好用，和抗体的兼容性和很好啊。据介绍也适用于小鼠和人。http://www.nwbiotec.com/index.ph ... ;a=prdt&id=3037