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流式检测细胞凋亡方法很多,从经典到新方法一网打尽

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发表于 2025-9-9 16:15:19 | 显示全部楼层 |阅读模式

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细胞凋亡(apoptosis)是机体维持内环境稳定的关键生理过程,也是疾病研究(如癌症、免疫疾病、神经退行性疾病)中的核心机制。与坏死(necrosis)不同,凋亡是一种程序化、主动、非炎症性的细胞死亡方式,具有细胞膜完整性改变、DNA片段化、线粒体功能障碍、半胱天冬酶(caspase)级联激活等特征。流式细胞术(flow cytometry)作为单细胞分析的金标准,能够定量、高通量、多参数地检测凋亡的不同阶段。每种方法的原理、操作步骤、优缺点、适用场景均进行详细解读,并提供实验设计建议,帮助研究人员选择最合适的技术路线。

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发表于 2025-9-10 14:32:13 来自手机 | 显示全部楼层
老师,我想问下,线粒体膜电位检测那里,使用JC-1染色细胞,有多药耐药干扰:P糖蛋白可排出染料,我不太懂这个排除染料的意思,是会抑制染料的荧光吗?在流式检测中具体会表现为什么情况呢,是否会影响荧光的激发,从而呈现非常规的JC-1染色流式图?因为我曾经做一个药的JC-1流式,结果不好,反复做,这个药物组的荧光图都看不到正常的细胞团,全部缩成一条线,其他空白和阳性对照图都正常的。同时,我发现同样的JC-1用量下,加药组细胞沉淀的颜色并没有呈现明显的红色,一般我们用了JC-1染色细胞,离心,细胞团都会显红色。
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 楼主| 发表于 2025-9-10 15:22:56 | 显示全部楼层
Nianlinliushi 发表于 2025-9-10 14:32
老师,我想问下,线粒体膜电位检测那里,使用JC-1染色细胞,有多药耐药干扰:P糖蛋白可排出染料,我不太懂 ...

耐药肿瘤细胞的PGP会泵出药物,避免被药物作用,同样它也可以泵出染料,导致JC-1染料染不上或染色效果不好

至于你说的情况,看描述不太好确定原因,需要首先在正常细胞上先做,明确染料没问题,再在此类细胞上做,并设置阳性对照
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发表于 2025-9-15 13:16:46 来自手机 | 显示全部楼层
好的,学到了,谢谢老师!
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