流式分选和磁珠分选比较

hx0628 · 发表于 2012-3-8 23:40:41

本帖最后由 hx0628 于 2012-3-8 23:41 编辑

流式分选有磁珠无法比拟的优势，现在做单一标记的分选在很多时候已经不能满足试验的要求了。3.4个抗体标记细胞的分选对于特别是干细胞的研究来说也只是个基本条件。现在的机器越来越稳定、简单、智能化，大大减少了分选的时间，并能提高分选的纯度和回收率。我是新手，请多多指教。

tree1004 · 发表于 2012-4-24 15:33:26

很好的帖子

olivezhou0716 · 发表于 2012-5-8 11:13:54

郭老师分析的很精彩。
不过需要指出的是，在纯度和分选应用方面磁珠的并不差，比如CRP说的那个纯度在很多细胞中都是可以达到的，而且这个对于个人技术水平的要求要比流式低多了，复杂的调机器/选择模式/补偿的问题都无需考虑，按照说明书就行了。
从事免疫学领域的老师一般不用担心细胞多标记的问题，比如郭老师提到的CD4+CD25+CD127LOW的细胞，有专门的试剂盒。
细胞活性方面确实是磁珠分选高，原因除了郭老师提到的充电荷/速度/鞘液等原因外，还有就是分选时间短，分选柱中铁柱的亲水包被保护作用。无菌也是非常重要的，这个对于美天旎的小型分选（分选仪和分选器）可以轻松做到，对于流式就比较难了。
还有一个就是郭老师说的，如果实在希望进行流式分选，在分选之前用磁珠进行预富集，可以大大提到流式分选的效果。

gcz5340 · 发表于 2012-5-8 20:28:19

olivezhou0716 发表于 2012-5-8 11:13

登录/注册后可看大图

郭老师分析的很精彩。
不过需要指出的是，在纯度和分选应用方面磁珠的并不差，比如CRP说的那个纯度在很多细 ...

感谢精彩的补充内容。Miltenyi现在有很多产品和技术在流式中都有很好的应用，但像我这样主要做流式的可能就不是很了解，欢迎你多发帖多回帖，让大家都能接触一些新的技术和理念，这样才能在实验中选择最合适的方法。
另外想问一下你说的CD4+CD25+CD127LOW的试剂盒具体是怎么操作的，低比率的分选纯度能达到多少？

niwanmao · 发表于 2012-5-8 20:45:08

gcz5340 发表于 2012-5-8 20:28

登录/注册后可看大图

感谢精彩的补充内容。Miltenyi现在有很多产品和技术在流式中都有很好的应用，但像我这样主要做流式的可能 ...

也欢迎你多多分享平时做流式分选的技巧、经验，像我们这些没有做过的都很需要一些实例领进门

hufan1978 · 发表于 2012-5-16 18:07:42

Magnetic cell sorting and flow cytometry sorting methods for the isolation and f.pdf (221.29 KB, 下载次数: 34)
有篇文章详细分析了流式和磁珠
中国人写的英文
凑合看吧
比较偏向流式

hufan1978 · 发表于 2012-5-16 18:12:31

流式分选最大的优势是可以按阳性强弱分选，磁珠只能辨别有或无，流式可以分辨强弱。
但是，流式分选的速度是比不过磁珠的。

olivezhou0716 · 发表于 2012-5-25 16:38:42

CD4CD25CD127的kit是通过先去除后阳选的方法把CD4-CD127+的细胞先去掉，在用CD25的磁珠阳性选择，获得这群细胞，低表达的细胞比例比较难说占多少，因为弱表达去除掉其实也是因为结合不够紧，会随着阴性细胞一起被洗掉。美天旎的分选产品都有比较详细的操作说明，按照操作说明做就行了。要提醒大家的是，样品（上柱前的单细胞制备）制备非常重要，大部分实验出了问题的客户基本都是因为样品制备不是很好导致的。

cookieyz · 发表于 2013-6-21 12:25:40

麻烦哪位老师帮忙解决一下问题：如果想要分选CD8+CD62L-CCR7-细胞的话选用哪种方式比较好呢？是流式还是磁珠还是两者结合呢？谢谢了哦

niwanmao · 发表于 2013-6-21 13:03:19

cookieyz 发表于 2013-6-21 12:25

登录/注册后可看大图

麻烦哪位老师帮忙解决一下问题：如果想要分选CD8+CD62L-CCR7-细胞的话选用哪种方式比较好呢？是流式还是磁 ...

是否可以用磁珠先阳选，再阴选？
用流式应该也可以。
@gcz5340 @olivezhou0716 @samly0

账号		自动登录	找回密码
密码			加入流式中文网

[流式分选] 流式分选和磁珠分选比较

评分

评分