关于间标流式中一抗的使用问题

kobe327292007

niwanmao 发表于 2012-8-30 15:35

                               
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原来是IL-15，不是有直标的抗体吗？http://www.rndsystems.com/pdf/IC2471C.pdf

另外，细胞因子都是胞内 ...

啊，不知道有直标的啊。
可是老师，我的实验设计是表达在膜上的IL15，就是信号肽+IL15+跨膜区，所以应该是表达在膜外的，能用你给的链接中的直标流式抗体么？？

niwanmao

kobe327292007 发表于 2012-8-30 16:42

                               
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啊，不知道有直标的啊。
可是老师，我的实验设计是表达在膜上的IL15，就是信号肽+IL15+跨膜区，所以应该 ...

细胞因子大部分都有直标抗体，你还可以搜搜其它公司看，这个链接是我google直接搜索出来比较靠前的。

膜上怎么会有IL-15呢？不是受体吧？

kobe327292007

niwanmao 发表于 2012-8-30 16:50

                               
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细胞因子大部分都有直标抗体，你还可以搜搜其它公司看，这个链接是我google直接搜索出来比较靠前的。

膜 ...

所以是这个实验的特殊之处嘛，呵呵。
是把IL-15固定到膜上的，我这SANTA的间标抗体算是订废了，早知道这个论坛就好了，现在无限懊悔中~~~

niwanmao

kobe327292007 发表于 2012-08-30 18:11:25

                               
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[quote]niwanmao 发表于 2012-8-30 16:50 [url=forum.php?mod=redirect&go

这倒是奇妙，呵呵，如果不涉及到机密，可否在适当时候分享一下个中神秘之处

niwanmao

kobe327292007 发表于 2012-08-30 18:11:25

                               
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[quote]niwanmao 发表于 2012-8-30 16:50 [url=forum.php?mod=redirect&go

你为什么不试试破膜呢？或许是因为没有固定成功呢？如果没有固定成功，就算是直标抗体也是一样的

kobe327292007

niwanmao 发表于 2012-8-30 18:57

                               
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你为什么不试试破膜呢？或许是因为没有固定成功呢？如果没有固定成功，就算是直标抗体也是一样的 ...

老师，我的细胞是悬浮细胞，你觉得用哪个破膜剂比较好呢？我准备订购了。还有，我以前做直标抗体的时候从来没有固定过啊，用什么固定比较好？

niwanmao

kobe327292007 发表于 2012-9-5 14:30

                               
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老师，我的细胞是悬浮细胞，你觉得用哪个破膜剂比较好呢？我准备订购了。还有，我以前做直标抗体的时候从 ...

是做胞内还是核内的标记？

kobe327292007

niwanmao 发表于 2012-9-5 14:38

                               
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是做胞内还是核内的标记？

胞内的。
现在不知道到底设计表达的蛋白是膜内还是膜外表达的，都试试吧，反正抗体有的是。

niwanmao

kobe327292007 发表于 2012-9-5 14:51

                               
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胞内的。
现在不知道到底设计表达的蛋白是膜内还是膜外表达的，都试试吧，反正抗体有的是。 ...

哦。那可以试试各种商业化的破膜剂。我以前用过caltag的fix & perm觉得不错，不过该公司后来被invitrogen收购了，现在的破膜剂质量不知道如何。

我现在用的破膜剂感觉没以前的好。

kobe327292007

niwanmao 发表于 2012-9-5 15:11

                               
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哦。那可以试试各种商业化的破膜剂。我以前用过caltag的fix & perm觉得不错，不过该公司后来被invitrogen ...

http://tools.invitrogen.com/cont ... /L12001_Rev0310.pdf
你看看是这个链接么？
以后可能长期做PBMC方面的实验，已经决定长期驻留流式中文网了~