Th17样本对照

liaoyanchun

niwanmao 发表于 2013-4-21 23:17

                               
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是的，用cd4单标的fmo看看pe通道荧光。

倪老师,我现在在用129s小鼠的cd4T细胞诱导TH17的分化,如果刚提出来的cd4直接标FITC的话阳性率较高,但是培养3天后细胞团的位置发生变化,大部分移到碎片的位置,培养6天后基本都在碎片的位置,我培养室用的是5ug/ml anti-mouse-cd3包板4度过夜,anti-mouse-cd28用的是2ug/ml,为什么我的细胞培养后状态发生那么大的变化,更别说TH17的诱导了...

niwanmao

liaoyanchun 发表于 2013-7-30 23:47

                               
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倪老师,我现在在用129s小鼠的cd4T细胞诱导TH17的分化,如果刚提出来的cd4直接标FITC的话阳性率较高,但是培 ...

那细胞可能是死了。
我觉得是不是得注意细胞密度和抗体浓度，参见：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2504-1-1.html

liaoyanchun

niwanmao 发表于 2013-7-31 07:38

                               
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那细胞可能是死了。
我觉得是不是得注意细胞密度和抗体浓度，参见：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2 ...

感谢,不过我在很多文献上看的用的是微克级,在流式论坛里却看到有人用纳克级

niwanmao

liaoyanchun 发表于 2013-8-1 08:15

                               
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感谢,不过我在很多文献上看的用的是微克级,在流式论坛里却看到有人用纳克级 ...

链接里面应该是微克级的啊。
@wolfrog  和 @pushiming77  两位站友在这方面实战经验很足。