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楼主: 麦小光

磷酸化蛋白流式经验分享

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发表于 2021-7-26 18:35:52 | 显示全部楼层
麦小光 发表于 2021-7-25 00:23
时间太长了,可以先摸索一下,个人建议根据细胞的不同,30-45min吧,太久了容易碎。而且量也可以适当减少 ...

感谢楼主的回复, 请问30-45min是在室温条件还是2-8摄氏度?
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 楼主| 发表于 2021-8-10 13:17:31 | 显示全部楼层
stf1990 发表于 2021-7-26 18:35
感谢楼主的回复, 请问30-45min是在室温条件还是2-8摄氏度?

我是在冰上,也就是4℃
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发表于 2023-4-20 00:14:57 | 显示全部楼层
hello 想问一下,换了的细胞还是贴壁细胞么?因为我现在使用贴壁细胞 感觉从消化、清洗再到固定 要一段时间,这段时间会影响磷酸化的修饰水平...
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发表于 2023-4-20 08:40:29 | 显示全部楼层
dongfangyao 发表于 2023-4-20 00:14
hello 想问一下,换了的细胞还是贴壁细胞么?因为我现在使用贴壁细胞 感觉从消化、清洗再到固定 要一段时间 ...

按照楼主的说法,应该是染色前消化到半脱离状态,直接进行固定,再接着后续的洗涤、破膜步骤,应该不会影响。
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