历时1个月，终于做出来早期凋亡，望老师和同道们指点~

zxt2009

逗逗 发表于 2021-8-6 08:47
你好，想请问一下，你说的温育是指消化后，仍然在板内加入全培养基，放入培养箱，再培养30min吗？那收集的 ...

收集的管子里哈

TRYTRYTRY

你好，感谢你的分享。我也是在做凋亡实验，开始正常组也是早凋很高，发现确实跟胰酶处理有关，按照你的建议正常组细胞消化后再孵育，早凋会控制的很好，但是并没有按照孵育30min那么严格。同时也有一个疑问，其他处理组同样也是用胰酶消化，那么为了消除胰酶影响，也可以消化下来后再在培养基中孵育30min吗？因为我按既定顺序处理不同组时，我发现虽然用培养基同时终止了（1ml胰酶+1ml完全培养基终止）用于消化的胰酶，但是“后处理”的对照组（DMSO组）比“先处理”的药物损伤组早凋明显增高。总之，我发现胰酶消化，以及消化后处理时间能对不同组的凋亡产生明显影响，不知道有没有好的建议可以控制该变量。

zxt2009

TRYTRYTRY 发表于 2021-10-20 21:49
你好，感谢你的分享。我也是在做凋亡实验，开始正常组也是早凋很高，发现确实跟胰酶处理有关，按照你的建议 ...

每个组都需要同时放进培养箱孵育哦，兄弟。否则你就是人为造成了差异啊。
另外胰酶消化时间可以尽力控制到每个组一样，具体方法就是1个组1个组的做，正常组细胞理论上状态最好，可以放到最后进行消化。

TRYTRYTRY

zxt2009 发表于 2021-10-29 23:34
每个组都需要同时放进培养箱孵育哦，兄弟。否则你就是人为造成了差异啊。
另外胰酶消化时间可以尽力控制 ...

谢谢分享，收获颇多

wxt1997ann

您好，我想问下~空白对照组的Q2和Q3也可以这么高嘛？感觉文献里的空白对照组，Q2和Q3加起来一般在5%以下啊。我在做4T1细胞的时候发现怎么做都容易有Q2\Q3门加起来超过10%，这样是正常的嘛？可发表吗？