Isotype的荧光值反而高？

niwanmao

Jeffery_9 发表于 2022-11-9 09:03
倪老师，那BD的Human Fc block可以封闭mouse的细胞吗？ anti-mouse CD16/CD32 是不是排除不了CD64的影响 ...

理论上不通用。
小鼠的Fc  block理论上可阻断非特异性结合，你那边做出来效果不理想吗？

Jeffery_9

好的老师，我再试一次吧
现在就是染DC上面一个间标的抗体，isotype比实验组还高，判断不了真正的阴阳性，那如果用Fc block后的FMO设门可信吗？

niwanmao

Jeffery_9 发表于 2022-11-9 13:28
好的老师，我再试一次吧
现在就是染DC上面一个间标的抗体，isotype比实验组还高，判断不了真正的阴阳性，那 ...

可信。另外，请仔细阅读前面推荐的那篇帖子，包括抗体亚型选择。

Jeffery_9

niwanmao 发表于 2022-11-9 18:01
可信。另外，请仔细阅读前面推荐的那篇帖子，包括抗体亚型选择。

倪老师，上周又尝试了一次，发现加了Fc block （BD和Biolegend都试过）后，结果还是IgG的荧光值最高，所以不太确定到底用什么设门了

niwanmao

Jeffery_9 发表于 2022-11-21 11:39
倪老师，上周又尝试了一次，发现加了Fc block （BD和Biolegend都试过）后，结果还是IgG的荧光值最高，所 ...

IgG2b相对更好。

如果找不到IgG2b亚类的抗体，那么只能用Fc Block直接作为对照。IgG1的isotype舍弃掉。

多纳泰罗豪

楼主，你的FAP流式抗体是哪个公司购买，货号多少

steven

多纳泰罗豪 发表于 2022-12-1 17:12
楼主，你的FAP流式抗体是哪个公司购买，货号多少

R&D MAB9727

特勒兮兮

ISO浓度太高啦

steven

特勒兮兮 发表于 2023-3-27 10:45
ISO浓度太高啦

和对应的1抗浓度相同啊。

特勒兮兮

steven 发表于 2023-8-2 15:37
和对应的1抗浓度相同啊。

看峰形就知道两个抗体的浓度都高了