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楼主: 椴树

[结构和原理] FITC单染补偿?火箭峰是什么?

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发表于 2013-5-9 16:01:58 | 显示全部楼层
椴树 发表于 2013-5-9 15:27
谢谢,你讲的 我不太明白,“FITC单染后PI荧光强度基本和空白持平”这是怎么看出来的啊,FITC单染后不是 ...

FITC单染后只有LL和LR象限有细胞是因为你调补偿了,如果不调补偿的话细胞会进入UR象限。补偿是否正确的标准是没有加荧光素的通道荧光强度与对照管一致。
只能说大部分正常情况下的不染色细胞是近似圆形的分布,但也不能说你这种情况不正常,其实这种情况经常碰到,特别是培养后的细胞。
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 楼主| 发表于 2013-5-10 11:41:28 | 显示全部楼层
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发表于 2015-6-11 23:31:15 | 显示全部楼层
我是新人,也是有疑问,刚看到这个帖子,和我的现象一样,总是解决不了,借老帖子再次请教一下论坛里的老师们,这种对角线的情况怎么处理,我的细胞也是原代培养的贴壁细胞,请不吝赐教
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发表于 2015-6-12 16:11:08 | 显示全部楼层
cn981 发表于 2015-6-11 23:31
我是新人,也是有疑问,刚看到这个帖子,和我的现象一样,总是解决不了,借老帖子再次请教一下论坛里的老师 ...

用live/dead染料去掉死细胞,多数情况下可改善明显。
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发表于 2015-6-13 09:51:16 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-6-12 16:11
用live/dead染料去掉死细胞,多数情况下可改善明显。

倪老师的意思是,火箭峰是死细胞太多引起的吗?是死细胞对两种染料都能结合的缘故?这种现象和仪器太久没有微球校正有无关系
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发表于 2015-6-13 15:00:04 | 显示全部楼层
cn981 发表于 2015-6-13 09:51
倪老师的意思是,火箭峰是死细胞太多引起的吗?是死细胞对两种染料都能结合的缘故?这种现象和仪器太久没 ...

和仪器校正没有关系,和标本本身有关。
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