鱼类多倍体检测（DNA含量），十万火急！

virginforest · 发表于 2014-9-4 12:26:14

另外成熟的红细胞没有增值功能，判别倍体，就没必要用modfit了，直接 cellquest lin模式看样品之间主峰的位移就行。
本来就没有增殖，那个S%和G2/M%不就没有意义了嘛

landinsky · 发表于 2016-9-24 09:47:49

做鱼类的倍性分析没有这么复杂的，用1ul新鲜血液，加试剂染色10秒，直接上机测试，DAPI通道设为线性，一分钟就出结果了。

landinsky · 发表于 2016-9-24 09:52:29

准确的说，取新鲜鱼血最多1ul，加入1ml Partec CyStain DNA 1 Step染液中，轻微晃动混匀，即可立即上机测试。这是全部的步骤，做鱼的倍性分析无需区分红细胞，白细胞，因为各种细胞的倍性都是一样的，同样倍性的各种细胞都会累积在同一个峰内，直接读主峰的Mean值即可。

niwanmao · 发表于 2016-9-24 10:33:23

landinsky 发表于 2016-9-24 09:52
准确的说，取新鲜鱼血最多1ul，加入1ml Partec CyStain DNA 1 Step染液中，轻微晃动混匀，即可立即上机测试 ...

啊？鱼类所以的细胞倍性都一样？它们的红细胞不脱核？

landinsky · 发表于 2016-9-24 11:06:14

鱼红细胞是有核的，所以不需要破除红细胞，就可以检测染色体倍性，而且更因为如此，只需要加1ul血就会有过量的细胞可以被染色。

hadaraa · 发表于 2018-7-27 09:30:17

jordanping23 发表于 2014-4-28 00:48
1、关于鸡红细胞按照的问题，有内参和外参两种说法，不一定非得内参。另外，根据已知的鸡红细胞和本实验鱼 ...

您好，请问絮状沉淀问题是怎么解决的呢？

hadaraa · 发表于 2018-7-27 09:34:59

niwanmao 发表于 2014-4-28 12:46
1、你要确定倍性，必须要用参照，首先建议用鸡红细胞做倍性参照，而且必须要有一管鸡红细胞＋待测标本的 ...

您好，我先问一下鸡红细胞参照的问题，除了一管混合的之外，单独鸡红细胞还需要吗？

hadaraa · 发表于 2018-7-27 09:42:42

niwanmao 发表于 2014-4-18 11:26
用已知二倍体可以的。FL2-W的AMP可以稍微调高一点

倪老师，如果不用已知二倍体，只用鸡红细胞可以吗？

niwanmao · 发表于 2018-7-27 21:44:20

hadaraa 发表于 2018-7-27 09:42
倪老师，如果不用已知二倍体，只用鸡红细胞可以吗？

可以的。用鸡红细胞做倍体参照。

hadaraa · 发表于 2018-7-30 08:09:15

niwanmao 发表于 2018-7-27 21:44
可以的。用鸡红细胞做倍体参照。

是每个待测样品管里都需要加鸡红细胞作对照吗？

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