鱼类多倍体检测（DNA含量），十万火急！

niwanmao

hadaraa 发表于 2018-7-30 08:09
是每个待测样品管里都需要加鸡红细胞作对照吗？

如果样本类型都不同，建议每个样本都做：
1、样本+鸡红细胞
2、纯样本
前者可以确定倍体性质，后者用于正式分析数据。

hadaraa

niwanmao 发表于 2018-7-30 21:29
如果样本类型都不同，建议每个样本都做：
1、样本+鸡红细胞
2、纯样本

明白了，谢谢您。如果只单独用一个鸡红细胞做对照的话，很不严谨，每管样品内细胞量不同，也会影响结果的吧。

hadaraa

niwanmao 发表于 2018-7-30 21:29
如果样本类型都不同，建议每个样本都做：
1、样本+鸡红细胞
2、纯样本

倪老师，我还有一个问题，就是我用乙醇固定红细胞的时候也会产生絮状沉淀，请问可以不用乙醇固定吗？可以直接用TritonX100破膜，然后加RnaseA，PI染液上机吗？

niwanmao

hadaraa 发表于 2018-8-1 08:01
倪老师，我还有一个问题，就是我用乙醇固定红细胞的时候也会产生絮状沉淀，请问可以不用乙醇固定吗？可以 ...

红细胞用乙醇确实会产生问题。可以用Triton X-100试试。

niwanmao

hadaraa 发表于 2018-7-31 10:50
明白了，谢谢您。如果只单独用一个鸡红细胞做对照的话，很不严谨，每管样品内细胞量不同，也会影响结果的 ...

不好意思，前面讲错了，因为鸡红细胞的DNA指数只有0.35，所以不会对结果产生影响，所以需要每个样本里面加入鸡红细胞，到时候直接可分析。并且不需要另外设纯样本那管。

hadaraa

niwanmao 发表于 2018-8-1 11:31
不好意思，前面讲错了，因为鸡红细胞的DNA指数只有0.35，所以不会对结果产生影响，所以需要每个样本里面 ...

好的，谢谢倪老师。因为PI单染测红细胞细胞周期比较麻烦，所以我打算使用sysmex cystain DNA 1 step这个DAPI染液了，您了解这个染液吗？我打算使用BD Influx这个仪器，这个仪器可以使用DAPI染液吗？

hadaraa

landinsky 发表于 2016-9-24 09:52
准确的说，取新鲜鱼血最多1ul，加入1ml Partec CyStain DNA 1 Step染液中，轻微晃动混匀，即可立即上机测试 ...

您好，我也想用这个染液检测鱼的倍性，这个还需要正常或者鸡血作对照吗？

landinsky

检测鱼的倍性，不需要鸡血对照