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单核细胞分化的AML,如何做MRD分析?

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发表于 2021-6-28 10:17:53 | 显示全部楼层 |阅读模式

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对具有单核细胞分化的AML进行MRD分析是非常具有挑战性的,如急性粒单白血病(AMML;又称FAB AML,M4)、急性单核细胞白血病(AMoL;又称FAB AML,M5a和M5b),以及由慢性粒单核细胞白血病引起的AML。在许多情况下,很难通过免疫分型区分未成熟的单核细胞(原始单核细胞或幼稚单核细胞)和成熟的单核细胞。

首先,未成熟的单核细胞没有高度特异性的免疫表型标志物。CD14表达的完全丧失往往表明不成熟;然而,这只发生在一小部分病例中。其他标志物,如CD13、CD36和/或HLA-DR的减少,以及CD15的表达增加,经常在不成熟的单核细胞中观察到;然而,这些改变的特异性较低,因为它们也可以在反应性或发育不良的单核细胞中看到。

其次,在治疗后,肿瘤性未成熟单核细胞可能表现出进一步的免疫表型成熟或分化。另一方面,在化疗或造血干细胞移植后,往往有许多反应性单核细胞可表现出免疫表型不典型性,如CD56的表达增加,HLADR和CD45减少。此外,一小部分肿瘤性单核细胞与背景反应性单核细胞混杂在一起的情况并不少见,这使其几乎无法被发现。

因此,对于有单核细胞分化的AML,仅根据比较治疗前和治疗后的单核细胞来评估MRD是不可靠的。根据作者的经验,重点分析治疗后BM样本中的CD34+髓系细胞往往更有用。

在诊断时,AMML通常既有原始粒细胞(CD34+CD117+),又有原始单核细胞或幼稚单核细胞。治疗后,检测到异常的CD34+原始粒细胞,无论是否存在异常的单核细胞,都可以诊断为MRD阳性。

下图是一个AML-M4的例子。原始粒细胞表现为CD13(增加)、CD33(异常的CD13与CD33模式)、CD34、CD38(减少)、CD123(增加)和HLA-DR(减少)等阳性(见图6A)。单核细胞成分(见图6C)为CD64、CD14(减少)、CD36(减少),CD34和CD117为阴性。该病例的染色体分析显示inv16(p13.1q22)阳性,荧光原位杂交(FISH)显示CBFB-MYH11阳性;因此,最终诊断为AML伴inv16(p13.1q22)。治疗后的单核细胞成分(见图6D)表型似乎正常且成熟的(CD64、CD14、CD36阳性,CD36强,而CD34和CD117为阴性)。然而,CD34+原始粒细胞却仍然呈现表型异常(见图6B),与初诊时相似,故判断该标本的MRD阳性,这个结果得到了染色体分析和FISH研究的支持。如果该病例的MRD评估仅基于单核细胞,则会被错误地称为MRD阴性。
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在AMoL(包括M5a和M5b)中,通常在诊断时,CD34+原始粒细胞非常少,往往少到无法正确定性;原始细胞似乎完全是单核细胞来源的。治疗后,如果是CR和恢复期的BM,正常的CD34+髓系前体细胞应该出现并表现出正常的表型。相反,在有残留白血病细胞的BM中,CD34+髓系前体细胞(可能是单核细胞的前体)会出现相对增高,并表现出免疫表型的异常。因此,关注CD34+原始髓系细胞仍然是AMoL病例的最佳方法。

总的来说,对于有单核细胞分化的AML,如果治疗后单核细胞出现免疫表型异常,通常不具有诊断意义,但如果同时检测到异常的CD34+原始髓系细胞,可能有助于支持MRD阳性的诊断。如果单核细胞正常,并不等同于MRD阴性。在评估具有单核细胞分化的AML的MRD时,建议关注CD34+原始髓系细胞。

参考文献:Xu J, Jorgensen JL, Wang SA. How Do We Use Multicolor Flow Cytometry to Detect Minimal Residual Disease in Acute Myeloid Leukemia? Clin Lab Med. 2017 Dec;37(4):787-802. doi: 10.1016/j.cll.2017.07.004. Epub 2017 Sep 28. PMID: 29128069.
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发表于 2021-7-2 22:34:00 | 显示全部楼层
倪老师,治疗后单核细胞出现免疫表型异常,有幼稚的的单核细胞都不具有诊断意义吗?
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 楼主| 发表于 2021-7-3 10:03:21 | 显示全部楼层
jiang0417 发表于 2021-7-2 22:34
倪老师,治疗后单核细胞出现免疫表型异常,有幼稚的的单核细胞都不具有诊断意义吗? ...

至少目前不具备明确的意义
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